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作者

李国栋 王洋洋 刘玉河 李湘奇

作者单位

泰山医学院附属医院普外科

刊名

中华肿瘤防治杂志

年份

2016

卷号

第23卷

期号

第17期

页码

1154-1158

ISSN

1673-5269

关键词

依赖帽状结构的转译 mTOR 4EBP1 结肠癌 细胞凋亡

分类号

R735.35

摘要

目的 EMD638683是SGK1高度特异性的抑制剂,能够促进结肠癌细胞的凋亡,但其促进结肠癌细胞凋亡的机制仍然不清楚。本研究探讨了依赖帽状结构的转译在EMD638683诱导结肠癌细胞的凋亡中的作用。方法 蛋白质印迹法实验检测EMD638683对AHCT116细胞中mTOR及4EBP1磷酸化的影响,随后通过m7GTP pull down实验检测EMD638683对HCT116细胞中eIF4F蛋白复合物形成的影响,最终通过蛋白质印迹法、流式细胞术和CCK8实验检测敲低4EBP1表达前后EMD638683对HCT116细胞中Survivin蛋白表达、细胞凋亡和存活的影响。结果 DMSO对照组pmTOR和p4EBP1相对值分别为1.00±0.07和1.00±0.08,而10、25和50μmol/L EMD638683处理组pmTOR相对值分别为0.72±0.09、0.45±0.11和0.25±0.06,p4EBP1相对值分别为0.81±0.05、0.43±0.07和0.22±0.11;DMSO对照组与eIF4E相互作用的EIF4G的相对值为1.00±0.06,而10、25和50μmol/L ...更多

目的 EMD638683是SGK1高度特异性的抑制剂,能够促进结肠癌细胞的凋亡,但其促进结肠癌细胞凋亡的机制仍然不清楚。本研究探讨了依赖帽状结构的转译在EMD638683诱导结肠癌细胞的凋亡中的作用。方法 蛋白质印迹法实验检测EMD638683对AHCT116细胞中mTOR及4EBP1磷酸化的影响,随后通过m7GTP pull down实验检测EMD638683对HCT116细胞中eIF4F蛋白复合物形成的影响,最终通过蛋白质印迹法、流式细胞术和CCK8实验检测敲低4EBP1表达前后EMD638683对HCT116细胞中Survivin蛋白表达、细胞凋亡和存活的影响。结果 DMSO对照组pmTOR和p4EBP1相对值分别为1.00±0.07和1.00±0.08,而10、25和50μmol/L EMD638683处理组pmTOR相对值分别为0.72±0.09、0.45±0.11和0.25±0.06,p4EBP1相对值分别为0.81±0.05、0.43±0.07和0.22±0.11;DMSO对照组与eIF4E相互作用的EIF4G的相对值为1.00±0.06,而10、25和50μmol/L EMD638683处理组相对值分别为0.82±0.06、0.52±0.09和0.21±0.12;DMSO组Survivin相对值分别为1.00±0.05,而10、25、50μmol/L EMD638683处理组Survivin相对值分别为0.61±0.15、0.39±0.12和0.19±0.07。细胞凋亡检测结果发现,DMSO对照组HCT116细胞的凋亡率为(3.16±0.6)%,25μmol/L EMD638683处理组HCT116细胞的凋亡率为(29.66±2.89)%,而敲低4EBP1的HCT116细胞EMD638683处理组的细胞凋亡率为(7.83±1.16)%。CCK8细胞活性检测发现,DMSO对照组HCT116细胞的存活为1.00±0.04,25μmol/LEMD638683处理组HCT116细胞的存活为0.44±0.06,而敲低4EBP1的HCT116细胞EMD638683处理组的细胞存活为0.83±0.05。结论 SGK1抑制剂EMD638683能够通过mTOR信号通路抑制依赖帽状结构的转译,从而抑制Survivin蛋白的表达诱发结肠癌细胞HCT116的凋亡。收起

基金

山东省自然科学基金

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊