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作者

张俊江

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

赵廷宝

学位年度

2015

学位授予单位

泰山医学院

关键词

脊髓损伤 促神经再生因子复合剂 静脉注射 疗效评价

分类号

R651.205

摘要

研究N6（促神经再生因子复合剂）对脊髓损伤后不同时间点注射疗效观察。<br> 方法：<br> 统一采用最初由Allen,s创建的重物坠落法（Weight dropping,WD法）经由NYU（NYU/MASCIS Impactor modelⅡ）脊髓碰撞器建立大鼠急性脊髓损伤模型，碰撞器重锤质量为10g，接触面直径为2mm,设计打压高度12.5mm。将SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为3组，每组24只，共72只，即A组（对照组）：A1脊髓损伤后30min内注射生理盐水治疗，6只；A2脊髓损伤后8h内注射生理盐水，6只；A3脊髓损伤后24h内注射生理盐水治疗，6只；A4脊髓损伤后48h内注射生理盐水治疗，6只；途径为椎管内蛛网膜下腔注射，生理盐水剂量25ul。B组（加强龙组）：同样根据不同治疗时间点（30min内，8h内，24h内，48h内）分为B1，B2，B3，B4小组，每小组6只，每只注射剂量为30mg/kg,途径为尾静脉注射。C组（N6合剂组）：同上分为C1，C2，C3，C4小组，每小组6只，每只注射剂量为25ul，注射途径为椎管内蛛网膜下腔注...更多

研究N6（促神经再生因子复合剂）对脊髓损伤后不同时间点注射疗效观察。<br> 方法：<br> 统一采用最初由Allen,s创建的重物坠落法（Weight dropping,WD法）经由NYU（NYU/MASCIS Impactor modelⅡ）脊髓碰撞器建立大鼠急性脊髓损伤模型，碰撞器重锤质量为10g，接触面直径为2mm,设计打压高度12.5mm。将SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为3组，每组24只，共72只，即A组（对照组）：A1脊髓损伤后30min内注射生理盐水治疗，6只；A2脊髓损伤后8h内注射生理盐水，6只；A3脊髓损伤后24h内注射生理盐水治疗，6只；A4脊髓损伤后48h内注射生理盐水治疗，6只；途径为椎管内蛛网膜下腔注射，生理盐水剂量25ul。B组（加强龙组）：同样根据不同治疗时间点（30min内，8h内，24h内，48h内）分为B1，B2，B3，B4小组，每小组6只，每只注射剂量为30mg/kg,途径为尾静脉注射。C组（N6合剂组）：同上分为C1，C2，C3，C4小组，每小组6只，每只注射剂量为25ul，注射途径为椎管内蛛网膜下腔注射。脊髓损伤并药物治疗后72h统一取材，每小组中随机选取3只行组织包埋石蜡切片，用于HE染色，观察脊髓损伤组织解剖结构，水肿、变性坏死程度，炎性细胞浸润情况等,用于免疫组化检测神经细胞中凋亡诱导蛋白Caspase-3表达以及原为末端缺口标记（Tunel法）计数凋亡阳性细胞数；另3只用于提取脊髓组织蛋白，SDS-Page凝胶电泳法检测凋亡相关蛋白bcl-2,bax,Caspase-3表达量变化；比较在相同脊髓损伤的情况下，不同时间点，不同药物治疗后脊髓损伤恢复情况。<br> 结果：<br> 1.免疫组化Caspase-3及Tunel阳性神经细胞计数显示，C1、C2组阳性细胞数较C3、C4阳性细胞数明显减少，P＜0.05，存在统计学差异；<br> 2.Western-blotting结果显示：bcl-2蛋白在C1、C2组中表达明显增多，较C3、C4组存在统计学差异（P＜0.05）；caspase-3、bax蛋白则减少，同样存在统计学差异（P＜0.05）；<br> 3.免疫组化及Western-blotting结果显示：caspase-3在A1组较B1、C1增加明显，存在统计学差异。<br> 结论：<br> 在本项研究中，通过建立大鼠急性脊髓损伤模型，检测损伤后凋亡相关蛋白表达量的变化及计数神经细胞凋亡数，再次验证了N6复合剂对于大鼠脊髓损伤后的抑制神经细胞凋亡的治疗作用，并认为脊髓损伤后N6合剂的早期及时治疗，比拖延后的治疗，更有利于大鼠脊髓神经细胞的恢复。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

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