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作者

周新卫

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

王德才

学位年度

2014

学位授予单位

泰山医学院

关键词

正天丸 肝微粒体 CYP3A4 抑制作用 卡马西平

分类号

R285.5

摘要

目的通过观察正天丸对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响，了解正天丸对肝微粒体细胞色素P450活性有无抑制作用。进一步通过体外孵育反应，研究正天丸对大鼠肝微粒体细胞色素P4503A4(CYP3A4)活性的影响，并计算IC50，结合体外实验，研究正天丸对卡马西平在大鼠体内药动学参数的影响。在以上实验结果的基础上，测定正天丸中总香豆素类成分的含量。为临床药物相互作用、不良反应防治等提供理论依据和实验资料，降低毒副作用和治疗成本，保证临床合理用药。方法1.将60只小鼠随机分为四组：溶媒对照组(2％吐温-80，20mL·kg-1)、阳性氯霉素组(25mg·kg-1)及正天丸低、高剂量(3，6g·kg-1)组，每组15只，连续等容灌胃3天，末次给药1h后，再给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg·kg-1或巴比妥钠180mg·kg-1，观察小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间。2.制备大鼠肝微粒体，建立体外孵育反应体系，以咪达唑仑(Midazolam，MDZ)为探针药，测定其代谢产物1’-羟基咪达唑仑(1’-OH-MDZ)的浓度。孵化反应分对照组、六种浓度的试药组和阳性氯霉素组，对照组为探针药反应，试药组则是正天...更多

目的通过观察正天丸对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响，了解正天丸对肝微粒体细胞色素P450活性有无抑制作用。进一步通过体外孵育反应，研究正天丸对大鼠肝微粒体细胞色素P4503A4(CYP3A4)活性的影响，并计算IC50，结合体外实验，研究正天丸对卡马西平在大鼠体内药动学参数的影响。在以上实验结果的基础上，测定正天丸中总香豆素类成分的含量。为临床药物相互作用、不良反应防治等提供理论依据和实验资料，降低毒副作用和治疗成本，保证临床合理用药。方法1.将60只小鼠随机分为四组：溶媒对照组(2％吐温-80，20mL·kg-1)、阳性氯霉素组(25mg·kg-1)及正天丸低、高剂量(3，6g·kg-1)组，每组15只，连续等容灌胃3天，末次给药1h后，再给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠40mg·kg-1或巴比妥钠180mg·kg-1，观察小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间。2.制备大鼠肝微粒体，建立体外孵育反应体系，以咪达唑仑(Midazolam，MDZ)为探针药，测定其代谢产物1’-羟基咪达唑仑(1’-OH-MDZ)的浓度。孵化反应分对照组、六种浓度的试药组和阳性氯霉素组，对照组为探针药反应，试药组则是正天丸醇提组分设六个浓度，分别为0.625、1.25、2.5、5、10和20mg·L-1。各管加入CYP3A4的探针药咪达唑仑后进行孵育反应20min，冰浴中冷却终止反应。用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定体外孵育反应体系中探针药代谢物1’-羟基咪达唑仑的终浓度。根据各个浓度的抑制率，求出半数抑制率(IC50)，判断正天丸醇提组分对大鼠肝微粒体CYP3A4活性的抑制作用强弱。3.取健康健Wistar大鼠12只，按体重随机分为2组。给药组给予4g·kg-1正天丸混悬液灌胃，每日1次，连续5日；对照组给予等容量生理盐水。末次灌胃1h后，各组大鼠均给予50mg·kg-1卡马西平灌胃，于卡马西平灌胃后0.25、0.5、1、1.5、2、3、5、7、10、15和24h时尾静脉取血0.5ml，离心出血浆，用高效液相色谱法测定各组血样中卡马西平的药-时血药浓度，并计算大鼠体内卡马西平的药动力学参数。4.选用5个批次的正天丸，提取正天丸中的总香豆素，以欧前胡素为对照品，采用紫外分光光度法,检测波长为300nm，测定正天丸中的总香豆素含量。结果1.氯霉素组和低、高剂量的正天丸组使戊巴比妥钠对小鼠的催眠时间分别延长222.2%、123.1%、42.6%，其中氯霉素组和低剂量的正天丸组与溶媒对照组比较，小鼠的催眠时间显著延长(P<0.01)；正天丸高剂量组对戊巴比妥钠的催眠时间影响小于低剂量组，高剂量组与溶媒对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。氯霉素组和低剂量正天丸组对巴比妥钠催眠潜伏期和催眠时间的影响与溶媒对照组比较均无显著性差异；高剂量正天丸组能显著延长巴比妥钠催眠潜伏期(P<0.01)，并缩短催眠时间(P<0.01)。2.空白对照组中探针药咪达唑仑的代谢物1’-羟基咪达唑仑的终浓度为2.62μmol·L-1。六个浓度的阳性对照药氯霉素均强烈抑制了1’-羟基咪达唑仑的生成率，且呈剂量依赖性抑制(P<0.01)。六个浓度的正天丸醇提组分对大鼠肝微粒体CYP3A4活性呈现出不同程度抑制作用，且亦呈剂量依赖性抑制(P<0.01)。正天丸醇提组分对CYP3A4活性的IC50值为8.99mg·L-1。3.两组卡马西平主要药动学参数：给药组达峰时间Tmax(3.756±1.460)、峰浓度Cmax(13.633±4.20)、药-时曲线下面积AUC(183.918±59.640)、消除半衰期T1/2ke(7.362±2.521)、消除速度常数Ke(0.833±0.850)、体内总清除率CL(0.3435±0.144)、表观分布容积V(3.774±2.095)；对照组Tmax(2.057±1.795)， Cmax(10.250±7.994)、AUC(162.788±18.247)、T1/2ke(5.710±2.677)、Ke(9.352±14.906)、CL(0.6735±0.584)、V(4.885±4.736)。用正天丸处理的给药组大鼠与对照组大鼠相比较，卡马西平的消除速率常数(Ke)和体内总清除率(CL)明显降低，消除半衰期(T1/2ke)延长，曲线下面积(AUC)增加，峰浓度(Cmax)明显升高，均P<0.05。4.不同批次的正天丸中总香豆素百分含量依次为1.262±0.033，1.104±0.032，1.288±0.024，1.464±0.036，1.476±0.056。结论1.正天丸可抑制小鼠肝微粒体细胞色素P450活性，同时对小鼠中枢神经系统有兴奋作用。2.正天丸醇提组分对大鼠肝微粒体CYP3A4活性呈现抑制作用，IC50为8.99mg·L-1。3.正天丸可抑制卡马西平在大鼠体内的代谢，消除速度明显减慢，血药浓度显著升高。4.正天丸中总香豆素百分含量为1.32。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

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