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作者

李凤立

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

靳卫国

学位年度

2014

学位授予单位

泰山医学院

关键词

卵巢癌 GOLPH3 转染 增殖 侵袭

分类号

R737.31

摘要

背景卵巢癌（ovarian carcinoma，OC）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，早期不易发现，一旦发现常常已属晚期。上皮性卵巢癌（Epithelial Ovarian Cancer, EOC)是卵巢癌中最常见的一种类型，是妇科肿瘤中死亡率最高的一种类型。目前卵巢癌的常规治疗仍然是手术、化疗、放疗和内分泌治疗等措施，但这些治疗方法都存在着疗效不佳的问题。随着分子生物学的发展，肿瘤分子的靶向治疗成为众多学者关注的热点，基因干扰技术正逐步用于目的基因及相关基因的作用机制的研究。高尔基体磷蛋白3（GOLPH3）是近年来发现的一种癌基因，在多种实体肿瘤中存在过表达，并与肿瘤的临床分期、肿瘤病理分级及转移侵袭密切相关。GOLPH3在多种生物学过程中发挥作用，参与多种恶性肿瘤的发展过程，其高表达多与不良的临床预后有关，而GOLPH3在卵巢癌的发生、发展中的作用机制目前还不清楚。目的本课题旨在研究GOLPH3在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系，并利用基因干扰技术初步探讨GOLPH3在卵巢癌细胞生物学行为方面的的作用机制，阐明GOLPH3在卵巢癌发生、发展过程中的作用。方法1...更多

背景卵巢癌（ovarian carcinoma，OC）是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，早期不易发现，一旦发现常常已属晚期。上皮性卵巢癌（Epithelial Ovarian Cancer, EOC)是卵巢癌中最常见的一种类型，是妇科肿瘤中死亡率最高的一种类型。目前卵巢癌的常规治疗仍然是手术、化疗、放疗和内分泌治疗等措施，但这些治疗方法都存在着疗效不佳的问题。随着分子生物学的发展，肿瘤分子的靶向治疗成为众多学者关注的热点，基因干扰技术正逐步用于目的基因及相关基因的作用机制的研究。高尔基体磷蛋白3（GOLPH3）是近年来发现的一种癌基因，在多种实体肿瘤中存在过表达，并与肿瘤的临床分期、肿瘤病理分级及转移侵袭密切相关。GOLPH3在多种生物学过程中发挥作用，参与多种恶性肿瘤的发展过程，其高表达多与不良的临床预后有关，而GOLPH3在卵巢癌的发生、发展中的作用机制目前还不清楚。目的本课题旨在研究GOLPH3在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系，并利用基因干扰技术初步探讨GOLPH3在卵巢癌细胞生物学行为方面的的作用机制，阐明GOLPH3在卵巢癌发生、发展过程中的作用。方法1.应用实时荧光定量PCR、蛋白印记法(Western blot)分别检测各组织标本中GOLPH3在mRNA和蛋白水平的表达，并与患者临床病理特征进行相关性分析。2.构建针对人GOLPH3基因的shRNA表达质粒（GOLPH3-shRNA），转染人卵巢癌SW626细胞系，使GOLPH3基因沉默。3.利用CCK-8、细胞克隆形成实验及Transwell小室法检测GOLPH3-shRNA转染后对SW626细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果1.GOLPH3mRNA在卵巢浆液性囊腺癌组织中的表达高于卵巢囊腺瘤组（2.33-7.34倍），差异具有统计学意义（P＜0.05）。GOLPH3蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织中阳性表达率（73.8%）明显高于卵巢囊腺瘤组（35.71%）（P＜0.01），差异具有统计学意义。2.GOLPH3蛋白阳性表达与浆液性囊腺癌的临床分期(p=0.019)、病理分级(p=0.042)及有无淋巴结转移(p=0.000)有关，而与患者的年龄（p=0.881）无关（P>0.05）；并且肿瘤细胞的分化程度越低其GOLPH3蛋白表达量越高（P＜0.01），差异具有统计学意义。3.细胞实验中干扰质粒转染48小时后SW626细胞的转染效率约为75%，干扰组的GOLPH3的mRNA及蛋白表达水平的表达均明显下调(P <0.01)，差异具有统计学意义。4.干扰组肿瘤细胞的增殖能力受抑制(P <0.01)，且这种抑制作用与时间无关；卵巢癌肿瘤细胞的克隆形成能力降低(P <0.01)；卵巢癌肿瘤细胞的转移及侵袭能力亦明显降低(P <0.01)，差异具有统计学意义。结论1．GOLPH3在卵巢浆液性囊腺癌的发生、发展中发挥着重要的作用。2．GOLPG3促进卵巢癌的增殖、生长、迁移及侵袭，有可能成为卵巢癌治疗新的靶基因。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

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