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作者

姚树桐 赵莉 苗成 田华 杨娜娜 郭守东 翟雷 陈军 王义围

作者单位

泰山医学院基础医学院 承德医学院附属医院 泰山医学院动脉粥样硬化研究所，山东省高校动脉粥样硬化重点实验室

刊名

生理学报

年份

2014

卷号

第66卷

期号

第5期

页码

612-618

ISSN

0371-0874

关键词

内质网应激 氧化低密度脂蛋白 巨噬细胞 清道夫受体A1

分类号

R331.3;R363.2;R332

摘要

本文旨在研究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是否介导氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)所诱导的巨噬细胞清道夫受体A1 (scavenger receptor A1,SR-A1)上调.体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20mmol/L ERS抑制剂4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA)处理30 min后,再加入ox-LDL (50 mg/L)继续培养12h或2 mg/L ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)或2μmol/L毒胡萝卜素(thapsigagin,TG)继续培养4h.另外培养巨噬细胞分别给予0.5、1和2 mg/LTM处理4 h或给予2 mg/L TM处理1、2和4h.采用试剂盒检测细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)含量;分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术检测SR-A1和ERS标志分子糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78,GRP...更多

本文旨在研究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是否介导氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)所诱导的巨噬细胞清道夫受体A1 (scavenger receptor A1,SR-A1)上调.体外培养RAW264.7巨噬细胞,给予20mmol/L ERS抑制剂4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid,PBA)处理30 min后,再加入ox-LDL (50 mg/L)继续培养12h或2 mg/L ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin,TM)或2μmol/L毒胡萝卜素(thapsigagin,TG)继续培养4h.另外培养巨噬细胞分别给予0.5、1和2 mg/LTM处理4 h或给予2 mg/L TM处理1、2和4h.采用试剂盒检测细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)含量;分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术检测SR-A1和ERS标志分子糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78,GRP78)蛋白和mRNA表达变化;采用多功能酶标仪检测Dil-ox-LDL摄取情况.结果显示,PBA显著抑制ox-LDL所诱导的巨噬细胞内胆固醇蓄积.ox-LDL可显著上调SR-A1和GRP78表达,而PBA可明显抑制ox-LDL所诱导的SR-A1上调(P＜0.05),并使GRP78降低39.3％ (P=0.057).TM明显上调SR-A1蛋白表达,并促进巨噬细胞对ox-LDL的摄取,且呈浓度和时间依赖性,但对SR-A1转录水平没有明显影响,且ERS另一诱导剂TG也可明显上调SR-A1表达;而PBA则明显抑制TM和TG所诱导的上述变化.以上结果表明,ERS在ox-LDL所诱导的SR-A1上调中具有重要作用,进而促使巨噬细胞摄取更多的ox-LDL,导致泡沫细胞形成.收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

42