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作者

马健 杨艳茹 刘景景 李芳芳 陈美华 王浩 王蕾 孙立立 王凤泽 王德才 张汉霆

作者单位

Departments of Behavioral Medicine & Psychiatry and Physiology & Pharmacology，West Virginia University College of Medicine 泰山医学院药理学研究所 泰山医学院生命科学学院

刊名

中国药理学与毒理学杂志

年份

2016

卷号

第6期

页码

620-626，607

ISSN

1000-3002

关键词

脑胶质瘤 地昔帕明 替莫唑胺 逆转耐药 C/EBP同源蛋白

分类号

R739.41

摘要

目的 探讨抗抑郁药地昔帕明（DMI）对人脑胶质瘤耐药细胞（U251/TR）对替莫唑胺（TMZ）耐药作用的影响及其机制。方法 DMI 2080μmol·L-1或TMZ 0.510 mmol·L-1处理U251/TR细胞24 h,用CCK-8法测定DMI和TMZ对U251/TR细胞增殖抑制的半数有效量（IC50）。CCK-8检测TMZ(1和2 mmol·L-1)和DMI(20,30和40μmol·L-1)联合或单独处理U251/TR细胞24 h对细胞增殖抑制的影响,用金正均法计算Q值来评价两种药物的协同效应。TMZ(1 mmol·L-1)和DMI(30μmol·L-1)联合或单独处理U251/TR细胞24 h,以Hoechst33258染色观察细胞核形态,发光法检测胱天蛋白酶3活性;实时定量PCR和Western蛋白印迹法检测C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达;小干扰RNA（si RNA）沉默CHOP的表达后,观察TMZ(1 mmol·L-1)和DMI(30μmol·L-1)联合给药对U251/TR增殖抑制的影响。结果 DMI或TMZ单用对U251/TR细胞增殖均有明显的抑制作用,并且呈...更多

目的 探讨抗抑郁药地昔帕明（DMI）对人脑胶质瘤耐药细胞（U251/TR）对替莫唑胺（TMZ）耐药作用的影响及其机制。方法 DMI 2080μmol·L-1或TMZ 0.510 mmol·L-1处理U251/TR细胞24 h,用CCK-8法测定DMI和TMZ对U251/TR细胞增殖抑制的半数有效量（IC50）。CCK-8检测TMZ(1和2 mmol·L-1)和DMI(20,30和40μmol·L-1)联合或单独处理U251/TR细胞24 h对细胞增殖抑制的影响,用金正均法计算Q值来评价两种药物的协同效应。TMZ(1 mmol·L-1)和DMI(30μmol·L-1)联合或单独处理U251/TR细胞24 h,以Hoechst33258染色观察细胞核形态,发光法检测胱天蛋白酶3活性;实时定量PCR和Western蛋白印迹法检测C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达;小干扰RNA（si RNA）沉默CHOP的表达后,观察TMZ(1 mmol·L-1)和DMI(30μmol·L-1)联合给药对U251/TR增殖抑制的影响。结果 DMI或TMZ单用对U251/TR细胞增殖均有明显的抑制作用,并且呈浓度依赖性（r2=0.983,0.982,P1.15,证实TMZ和DMI联合给药具有协同效应。同时,DMI 30μmol·L-1和TMZ 1 mmol·L-1联和应用可诱导U251/TR细胞凋亡,主要表现为细胞核固缩、染色质沉积和胱天蛋白酶3的激活。这种凋亡诱导作用明显好于单独给药的效果（P<0.05）。DMI和TMZ联合应用能显著激活细胞内质网应激标志蛋白CHOP的表达（P<0.05）。以si RNA沉默CHOP表达后,DMI逆转TMZ耐药的作用明显减弱,联合给药组细胞生存率由51.8%升至62.2%（P<0.05）。结论 DMI能逆转人脑胶质瘤细胞U251/TR对TMZ的耐药性,其机制可能与激活CHOP表达有关。收起

基金

国家自然科学基金;山东省自然科学基金

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

59