获取途径

作者

付晓秀

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

齐永秀

学位年度

2011

学位授予单位

泰山医学院

关键词

消癌平 绿原酸 HPLC 指纹图谱 药物代谢动力学

分类号

R285

摘要

消癌平片和消癌平注射液均为植物通关藤的单味制剂,具有抗癌、消炎、平喘等功效,绿原酸为其中的有效成分之一。研究消癌平制剂的质量控制方法,比较绿原酸单体及制剂在大鼠体内的药物代谢动力学规律,可以为评价消癌平制剂的质量提供方法,并为深入研究消癌平的药效学提供理论依据。第一部分HPLC法测定消癌平片和消癌平注射液中绿原酸的含量目的:建立测定消癌平片和消癌平注射液中绿原酸含量的HPLC法方法:色谱柱为Diamonsil（?）（钻石）C18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为0.2%磷酸-甲醇（65:35）;流速为1ml·min-1 ;内标为替硝唑;检测波长为327nm;室温;20μl进样。结果:在2.22μg·ml-1～96.2μg·ml-1的范围内绿原酸浓度与绿原酸峰面积与内标峰面积的比值呈现良好的线性关系,线性方程为Y=0.0892X+0.0539（n=5）, r = 0.9999,方法精密度好,RSD（n=5）为1.72%;方法的回收率为99.9%103.7%;供试品溶液在分析浓度下,24小时内基本稳定。结论:建立了测定消癌平片和消癌平注射液中绿原酸含量的HPLC法,该法灵敏度高...更多

消癌平片和消癌平注射液均为植物通关藤的单味制剂,具有抗癌、消炎、平喘等功效,绿原酸为其中的有效成分之一。研究消癌平制剂的质量控制方法,比较绿原酸单体及制剂在大鼠体内的药物代谢动力学规律,可以为评价消癌平制剂的质量提供方法,并为深入研究消癌平的药效学提供理论依据。第一部分HPLC法测定消癌平片和消癌平注射液中绿原酸的含量目的:建立测定消癌平片和消癌平注射液中绿原酸含量的HPLC法方法:色谱柱为Diamonsil（?）（钻石）C18柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为0.2%磷酸-甲醇（65:35）;流速为1ml·min-1 ;内标为替硝唑;检测波长为327nm;室温;20μl进样。结果:在2.22μg·ml-1～96.2μg·ml-1的范围内绿原酸浓度与绿原酸峰面积与内标峰面积的比值呈现良好的线性关系,线性方程为Y=0.0892X+0.0539（n=5）, r = 0.9999,方法精密度好,RSD（n=5）为1.72%;方法的回收率为99.9%103.7%;供试品溶液在分析浓度下,24小时内基本稳定。结论:建立了测定消癌平片和消癌平注射液中绿原酸含量的HPLC法,该法灵敏度高,专属性强,适用于消癌平制剂的含量测定。第二部分消癌平注射液指纹图谱的建立目的:建立消癌平注射液HPLC指纹图谱分析方法。方法:色谱柱:Diamonsil（?）（钻石）C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,以A（甲醇）:B（磷酸盐缓冲液）为流动相,梯度洗脱（0. 00～10. 00 min,0→5% B;12.00～30.00 min, 5%→20% B;32.00～80.00min,20%→45%B）,流速1.0mL·min-1 ,检测波长327nm,柱温25℃,进样量20μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价》（2004年A版）软件,计算10批消癌平注射液HPLC指纹图谱的相似度。结果:在消癌平注射液中检测到9个共有指纹峰,各峰分离度良好,以绿原酸峰为参照物峰,各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均符合要求。结论:所建立的HPLC指纹图谱方法具有较好的精密度、稳定性和重现性,可用于消癌平注射液的质量控制。第三部分绿原酸血药浓度的HPLC测定法目的:建立大鼠血清中绿原酸的HPLC分析方法,为绿原酸的药代动力学研究提供检测技术。方法:采用迪马DiamonsilC18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为0.2%磷酸-甲醇（65:35）,流速为1.0ml-min-1;替硝唑为内标;检测波长为327 nm。取大鼠血清样品,加入内标,以甲醇去蛋白,0.22μm微孔滤膜过滤,37℃水浴挥干,固体残留物用100μl流动相溶解,20μl进样。结果:线性方程为Y=0.4058X+0.9881（r=0.9997）,在0.45μg-112μg范围内,线性关系良好,该分析方法检测限为0.0018μg,最低定量限为0.0062μg,高、中、低三种不同浓度血清样品平均回收率分别为98.55%、104.95%、83.24%,精密度实验RSD值分别为3.83%,2.29%,3.07%,重复性实验RSD值分别为4.64%,1.26%,1.58%。血清中绿原酸在-20℃冷冻避光条件下30天内稳定性较好。结论:建立了测定大鼠血清中绿原酸含量的HPLC分析方法,该法灵敏度好,专属性强,能够为绿原酸的药动学研究提供方法支持。第四部分消癌平制剂及其绿原酸单体的药动学研究目的:研究大鼠在灌胃和尾静脉注射绿原酸单体和消癌平制剂后绿原酸在大鼠体内的药动学特征,探讨消癌平制剂中其他成分对绿原酸代谢的影响,阐明绿原酸的药动学变化规律。方法:（1）绿原酸组: Wistar大鼠60只,体重180～220g,随机分为6组,每组10只（♂5只,♀5只）。灌胃单次给绿原酸40mg·kg-1、20 mg·kg-1、10 mg·kg-1,于给药后10min、30min、1h、1.5h、2h、4h、6h、8h、12h、24h尾尖取血0.5ml;尾静脉单次注射绿原酸40mg·kg-1、20 mg·kg-1、10mg·kg-1,于给药后5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min于尾尖取血约0.5ml,测定绿原酸含量。（2）消癌平组: Wistar大鼠20只,体重180～220g,随机分为2组,每组10只（♂5只,♀5只）,其中一组灌胃单次给消癌平溶液20ml·kg-1(相当于CGA 20 mg·kg-1),于给药后10min、30min、1h、1.5h、2h、4h、6h、8h、12h、24h尾尖取血0.5 ml。另外一组尾静脉单次给消癌平注射液2.5ml·kg-(1相当于CGA20mg·kg-1),于给药后5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min于尾尖取血约0.5 ml,测定绿原酸含量。（3）采用3P97药动学软件处理数据,以最佳房室模型为标准计算每只大鼠的主要药代动力学参数。结果:（1）大鼠灌胃绿原酸和消癌平片后,三个剂量组在0-24h的血清中均未能检测出CGA。（2）尾静脉注射高、中、低三种剂量后,绿原酸在大鼠体内的药动学行为均符合二室模型。主要药动学参数为:①iv.40mg·kg-1组:t1/2 alpha=19.781 min,t1/2beta=68.377min,Vc= 0.847L·kg-1·min-1,CLs= 0.029L·kg-1·h-1;②iv.20 mg·kg-1组: t1/2 alpha=15.221min,t1/2 beta=59.458min,Vc= 0.446L·kg-1·min-1,CLs= 0.017L·kg-1·h-1;③iv.10 mg·kg-1组: t1/2 alpha=7.878min,t1/2beta=56.783min,Vc= 0.257L·kg-1·min-1,CLs= 0.012L·kg-1·min-1。（3）静脉注射消癌平注射液后药动学行为符合二室开放模型,主要药动学参数为: t1/2 alpha=12.559min,t1/2beta=48.283 min,Vc= 0.403L·kg-1·min-1,CLs= 0.018L·kg-1·h-1。结论:大鼠灌胃给绿原酸和消癌平片后,血清中均未能检测出CGA。大鼠静脉注射绿原酸后,起始阶段血药浓度下降迅速,分布相半衰期t1/2 alpha小于20min,消除相半衰期t1/2 beta约为1h,高剂量组的消除半衰期t1/2 beta明显高于低剂量组,表观分布容积Vc和总清除率CLs与给药剂量呈正相关,随给药剂量的增加,药物在组织与细胞中的浓度增大,机体对药物的清除能力增强。静脉注射消癌平注射液后,制剂中的其他成分对绿原酸的代谢消除有协同作用,表观分布容积与药物总清除率没有明显变化。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

17