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作者

郑剑

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

高松

学位年度

2010

学位授予单位

泰山医学院

关键词

食管鳞癌 化疗药物敏感性 免疫组织化学 MTT比色法 PTEN Livin

分类号

R735.1

摘要

目的食管鳞癌是消化系统最常见恶性肿瘤之一,其治疗主要以手术切除为主并辅以术后化疗。但由于不同个体肿瘤细胞对化疗药物的敏感性不同及临床的经验用药等原因使化疗效果并不尽如人意。本实验着重研究原代培养食管鳞癌细胞对化疗药物的敏感性,并进一步探讨其敏感性与食管鳞癌组织中PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)及Livin基因表达的关系,为食管鳞癌的临床化疗提供个体化用药的实验资料和依据。方法取手术切除的新鲜食管鳞癌组织标本,在无菌条件下去除结缔、脂肪及坏死组织,取大小约1.5mm3组织块经研磨,过滤制备成活细胞浓度为(2～3)×105/ml的单细胞悬液,分别加入10倍血浆峰值药物浓度(PPC)的羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)用MTT法检测经上述药物作用后肿瘤细胞活力及代谢活性的变化；同时取食管鳞癌组织制成石蜡切片,用免疫组化检测PTEN、Livin蛋白的表达。结果84例食管鳞癌标本经MTT比色法药敏实验成功者81例。经化疗药物作用后,体外...更多

目的食管鳞癌是消化系统最常见恶性肿瘤之一,其治疗主要以手术切除为主并辅以术后化疗。但由于不同个体肿瘤细胞对化疗药物的敏感性不同及临床的经验用药等原因使化疗效果并不尽如人意。本实验着重研究原代培养食管鳞癌细胞对化疗药物的敏感性,并进一步探讨其敏感性与食管鳞癌组织中PTEN (phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)及Livin基因表达的关系,为食管鳞癌的临床化疗提供个体化用药的实验资料和依据。方法取手术切除的新鲜食管鳞癌组织标本,在无菌条件下去除结缔、脂肪及坏死组织,取大小约1.5mm3组织块经研磨,过滤制备成活细胞浓度为(2～3)×105/ml的单细胞悬液,分别加入10倍血浆峰值药物浓度(PPC)的羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素(MMC)用MTT法检测经上述药物作用后肿瘤细胞活力及代谢活性的变化；同时取食管鳞癌组织制成石蜡切片,用免疫组化检测PTEN、Livin蛋白的表达。结果84例食管鳞癌标本经MTT比色法药敏实验成功者81例。经化疗药物作用后,体外培养的食管鳞癌原代培养细胞呈现不同程度形态和代谢活动的变化。MTT结果显示,不同个体的食管鳞癌细胞对化疗药物的敏感性不同,其中HCPT、MMC及5-FU之间敏感性差异无统计学意义,P值均大于0.05；但HCPT、MMC及5-FU与ADM及CDDP之间敏感性差异具有统计学意义(P<0.05),前者明显高于后者；ADM敏感性明显低于CDDP,组间差异具有统计学意义(P<0.01)；在食管鳞癌组织及正常食管鳞癌粘膜中PTEN蛋白表达阳性率分别为47.5%、100%,两者差异具有有统计学意义(P<0.01)；PTEN蛋白阳性表达与食管鳞癌的分化程度及有无淋巴结转移组间差异具有有统计学意义(P<0.05),但与有无外膜浸润无关(P>0.05);在81例食管鳞癌组织中和20例正常食管鳞癌粘膜中Livin的阳性表达率分别为56/81(70%)和0/20,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Livin的表达与食管鳞癌的分化程度及有无淋巴结转移组间差异具有有统计学意义(P<0.05),但与有无外膜膜浸润无关(P>0.05); Livin阳性表达与5-FU及ADM耐药有关(P<0.05)；Livin阳性表达与PTEN蛋白阳性表达呈负相关关系(rs=-0.678,P<0.01)；羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)对原代食管鳞癌细胞的杀伤效应与食管鳞癌的分化程度、有无外膜浸润及有无淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。结论1、MTT药敏实验能有效的筛选化疗药物并能发现耐药病例,对临床化疗有较强的预见性和指导性；2、PTEN的下调表达及Livin的上调表达能促进食管鳞癌的淋巴结转移及降低分化程度；3、食管鳞癌组织中PTEN的表达与Livin的表达呈负相关关系,提示两者在食管鳞癌的发展中可能具有协同作用,两基因除各自直接作用外还可通过负性调节对方基因的表达而间接发挥功能。4、食管鳞癌组织中Livin阳性表达者与5-FU及ADM耐药有关,提示Livin可作为食管鳞癌原发性耐药标志之一收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

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