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作者

吴庆建

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

孙保亮

学位年度

2009

学位授予单位

泰山医学院

关键词

降钙素基因相关肽 蛛网膜下腔出血 脑血管痉挛 局部脑血流量 经鼻给药 数字剪影脑血管造影 中枢神经系统

分类号

R743.3

摘要

研究背景： 蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）是发病率仅次于脑梗死和脑出血的第三位急性脑血管疾病。绝大多数SAH系脑动脉瘤破裂所致，其病死率高达25％以上，存活下来的患者约1/3因神经功能缺损而需依赖他人生活，给社会和家庭带来沉重负担。脑血管痉挛（cerebral vasospasm，CVS）是SAH最常见的高危并发症，常可引起严重的脑组织缺血性脑损害，从而导致患者死亡或严重伤残。再出血和CVS是与SAH患者预后关系最密切的两大主要并发症。目前，对脑动脉瘤的闭塞术和血管内栓塞术取得了很大进步，SAH后再出血率已显著降低，然而SAH的总体预后并没有因此得到相应的改善，说明CVS与SAH患者的预后有着更为密切的关系。因此，在深入理解SAH后CVS发生机制的基础上，寻找出安全、有效、易于实施的防治措施是改善SAH预后的关键环节。降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）作为一种内源性舒血管神经肽，为目前已知作用最强的内源性舒血管活性物质，对脑血管有强烈的舒张作用。CGRP与脑血管病（CVD）的病理生理过程...更多

研究背景： 蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage，SAH）是发病率仅次于脑梗死和脑出血的第三位急性脑血管疾病。绝大多数SAH系脑动脉瘤破裂所致，其病死率高达25％以上，存活下来的患者约1/3因神经功能缺损而需依赖他人生活，给社会和家庭带来沉重负担。脑血管痉挛（cerebral vasospasm，CVS）是SAH最常见的高危并发症，常可引起严重的脑组织缺血性脑损害，从而导致患者死亡或严重伤残。再出血和CVS是与SAH患者预后关系最密切的两大主要并发症。目前，对脑动脉瘤的闭塞术和血管内栓塞术取得了很大进步，SAH后再出血率已显著降低，然而SAH的总体预后并没有因此得到相应的改善，说明CVS与SAH患者的预后有着更为密切的关系。因此，在深入理解SAH后CVS发生机制的基础上，寻找出安全、有效、易于实施的防治措施是改善SAH预后的关键环节。降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide，CGRP）作为一种内源性舒血管神经肽，为目前已知作用最强的内源性舒血管活性物质，对脑血管有强烈的舒张作用。CGRP与脑血管病（CVD）的病理生理过程密切相关，且对治疗各种缺血性脑血管病可能具有潜在价值。动物实验研究表明，CGRP能够逆转实验性SAH后CVS。由于CGRP的大分子特性限制了其从血液循环中透过血脑屏障而进入脑组织和脑脊液，常规的给药途径难以奏效。本实验的目的是寻找简便有效而无创靶向中枢的给药方法，探讨经鼻（IN）给予CGRP避开血脑屏障（blood brain barrier，BBB）进入中枢的可行性，并证实其对SAH后CVS是否具有保护作用。 研究目的： （1）．探讨经鼻给药途径可使CGRP绕过血脑屏障的阻碍而有效进入中枢神经系统，并阐明其中枢分布特点。 （2）．经鼻靶向中枢给予CGRP对SAH后CVS大鼠脑血流量和循环内皮细胞的影响。 （3）．观察经鼻应用CGRP对家兔实验性SAH后CVS是否具有防治作用。 研究方法： （1）．SPF级健康Wistar大鼠48只，随机分入六组①经鼻（IN）125I－CGRP正常组：在正常大鼠经鼻给予125I-CGRP50μl （1μg，20μCi）②经鼻125I-CGRP SAH组：造模后，经鼻给予125I-CGRP50μl（1μg，20μCi）③经鼻生理盐水（NS）正常组：在正常大鼠经鼻给予NS50μl④静注（Ⅳ）125I-CGRP正常组：在正常大鼠静脉注射1251-CGRP300μl（1μg，20μCi）⑤静注125I-CGRP SAH组：造模后，静脉注射125I-CGRP300μl（1μg，20μCi）⑥静注NS正常组：在正常大鼠，静脉注射NS300μl。应用放射免疫技术，比较经鼻给药和经静脉注射给药后30min，放射性标记的CGRP在各脑区、颈髓、脑脊液、血和周围组织中的定量分布。 （2）．采取枕大池二次注血法制作SAH后CVS模型。将64只清洁级Wistar大鼠随机分为4组（n=16）：A组：正常对照组；B组：SAH组；C组：IN NS SAH组；D组：IN CGRP SAH组。观察各组动物SAH术后行为变化；各组随机抽取8只用激光多普勒血流仪动态记录顶叶皮质局部脑血流量（rCBF）；余动物SAH后第三天，取静脉血标本检测血管内皮细胞（VEC）凋亡。 （3）．将健康新西兰兔32只随机分为4组（n=8），A组：正常对照组；B组（SAH组）：经枕大池穿刺二次注血法，制作SAH后CVS的模型；C组：（IN NS SAH组）第二次穿刺注血后，经鼻给予NS 0．4ml；D组：（IN CGRP SAH组）第二次穿刺注血后，经鼻给予CGRP（CGRP10μg溶媒0．4ml）。观察动物SAH术后行为变化，全部兔于二次注血后3d分别进行脑血管造影，测量基底动脉直径；3d后快速断头处死，取脑，分离皮层和海马组织，用干-湿重比较法计算脑组织含水率。 研究结果： （1）．IN给药组脑部各分区、CSF和颈髓中的CGRP浓度较Ⅳ组显著高出6-161倍（P<0．01），以嗅球的CGRP浓度最高，其次是CSF和颈髓。IN、IV给药后，药物分布在正常大鼠和SAH大鼠无显著性差异。 （2）．B组和C组在诱导SAH后30 min rCBF即明显低于A组，1h下降至最低值，在12 h内无明显恢复趋势。经鼻给予CGRP的动物在SAH后rCBF下降的速度较慢，降低的程度亦明显较B组和C组小。B组和C组的静脉血CEC计数水平比A组显著性升高（P<0．01），D组经鼻给予CGRP后CEC计数明显降低（P<0．01）。 （3）．与正常组相比较，SAH组和IN NS SAH组基地动脉痉挛明显，管径变窄（P<0．01），与SAH组和IN NS SAH组相比较，IN CGRP SAH组血管痉挛得到明显改善（P<0．01）。诱导SAH后3d，SAH组和IN NS SAH组的脑组织含水率显著高于正常对照组（P<0．01），IN CGRP SAH组与SAH组和IN NS SAH组相比，脑组织含水率明显降低（P<0．01）。 研究结论： （1）．经鼻给药方法可以避开BBB的障碍，迅速将CGRP递送到CNS，使CNS获得显著提高的CGRP浓度。 （2）．SAH后脑实质血流量下降，经鼻应用CGRP可以显著改善脑实质血流量；VEC损伤在SAH后CVS发生发展中起着重要作用，经鼻应用CGRP可减轻VEC损伤，保护血管内皮是CGRP预防SAH后CVS的可能机制之一；CVS后外周血液中CEC的数量增加，CEC可以作为SAH后CVS的预警因子。 （3）．经鼻应用CGRP可以防治家兔实验性SAH后CVS。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

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