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作者

石继魁

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

孟建中

学位年度

2008

学位授予单位

泰山医学院

关键词

内毒素 血液滤过 脓毒症 线粒体 氧化损伤

分类号

R442.8

摘要

目的： 采用CLP(盲肠结扎穿孔术)制备犬的脓毒症模型，对脓毒症犬进行体外循环血液净化治疗，观察高容量血液滤过联合内毒素吸附对其血流动力学及肝细胞线粒体的影响。本实验以观察脓毒症时线粒体氧化磷酸化的有关酶活性变化，探讨线粒体氧化损伤为切入点，研究血液净化技术改善脓毒症肝线粒体能量代谢障碍的可能作用机制。 方法： (1)脓毒症模型制备：12只健康杂种犬随机分成2组，分别为模型组、高容量血液滤过联合内毒素吸附组(简称HVHF组)，每组6只。二组均通过CLP(盲肠结扎穿孔术)制备脓毒素模型。行左股静脉及左股动脉穿刺术，分别置入5F Swan -Ganz漂浮导管(Arrow，美国)和20G动脉留置针(Ohmeda,美国)，连接Marquette Eagal 4000多功能监护仪(美国)行血流动力学监测。静脉注射咪唑安定400ug/kg,维库溴铵80ug/kg，经口气管插管，呼吸机控制呼吸，持续静脉泵注咪唑安定50ug/kg.h及维库溴铵40ug/kg.h维持镇静、肌松。所有有创操作均在2％利多卡因局部浸润麻醉下进行。 (2)体外循环构建：采用右股静脉留置导管作为CBP治疗的血管通路，连接BM2...更多

目的： 采用CLP(盲肠结扎穿孔术)制备犬的脓毒症模型，对脓毒症犬进行体外循环血液净化治疗，观察高容量血液滤过联合内毒素吸附对其血流动力学及肝细胞线粒体的影响。本实验以观察脓毒症时线粒体氧化磷酸化的有关酶活性变化，探讨线粒体氧化损伤为切入点，研究血液净化技术改善脓毒症肝线粒体能量代谢障碍的可能作用机制。 方法： (1)脓毒症模型制备：12只健康杂种犬随机分成2组，分别为模型组、高容量血液滤过联合内毒素吸附组(简称HVHF组)，每组6只。二组均通过CLP(盲肠结扎穿孔术)制备脓毒素模型。行左股静脉及左股动脉穿刺术，分别置入5F Swan -Ganz漂浮导管(Arrow，美国)和20G动脉留置针(Ohmeda,美国)，连接Marquette Eagal 4000多功能监护仪(美国)行血流动力学监测。静脉注射咪唑安定400ug/kg,维库溴铵80ug/kg，经口气管插管，呼吸机控制呼吸，持续静脉泵注咪唑安定50ug/kg.h及维库溴铵40ug/kg.h维持镇静、肌松。所有有创操作均在2％利多卡因局部浸润麻醉下进行。 (2)体外循环构建：采用右股静脉留置导管作为CBP治疗的血管通路，连接BM25型多功能血液净化机进行高容量血液滤过联合内毒素吸附治疗。 (3)观察指标：二组动物分别在模型制备前基础值(T0)、造模后1h(T1)、治疗1h(T2)、治疗2h(T3)、治疗3h(T4)、治疗4h(T5)时监测血流动力学指标及血乳酸(lac)值，实验结束，处死动物，提取肝脏，测定肝脏线粒体MDA、SOD活性、ROS、ATP酶、P/O比值。 结果： (1)脓毒症一旦构建成功，具有“高排低阻”的血流动力学特点。两组血液动力学各指标、肺循环及及氧合指数的基础值(T0)之间差异无统计学意义；两组均于造模1h(T1)出现HR、PMAP、PVRI明显增加、MAP和SVRI明显下降、CI增高及氧合指数显著降低。实施HVHF后，HVHF组心率逐渐平稳下降，在T2～T5较模型组及治疗前(T1)均有显著性降低。HVHF组MAP、每搏量(SV)明显上升，显著高于模型组；HVHF组CI无明显变化，模型组进行性下降并显著低于HVHF组；治疗结束时HVHF组M PA P、PVRI较模型组显著降低；治疗结束时HVHF组氧合指数较治疗前和模型组显著升高。血浆乳酸浓度模型组明显高于HVHF组。 (2)模型组肝线粒体内ATP含量明显下降，线粒体MDA、ROS含量升高，SOD活性下降，与HVHF组相比有统计学意义。 结论： (1)采用CLP(盲肠结扎穿孔术)的方法可成功地构建犬的脓毒症模型，且该模型在脓毒症的诱发因素、诊断标准、功能变化、病理改变等方面均与临床相似，从而为进一步研究脓毒症的形成与发展，提供了重要的技术平台。 (2)造模后犬肝线粒体出现能量代谢障碍，肝线粒体ATP含量及能荷水平下降，CBP能改善肝线粒体能量代谢障碍。其机制可能包括：高容量血液滤过联合内毒素吸附治疗能明显改善脓毒症犬的血流动力学，减轻线粒体氧化损伤，能清除心肌抑制物质、致炎介质和毒素的功能，提高氧合指数，改善氧合功能，维持内环境稳定，进而改善微循环和提高细胞摄取氧的能力，改善组织的氧利用。从而改善肝细胞线粒体能量代谢障碍。推测CBP改善肝线粒体能量代谢障碍不是通过某个单一因素、或单一机制，而是多途径，多靶点的作用结果。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

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