获取途径

作者

张国威 胡国文 牛鑫 汪泱 邓志锋

作者单位

上海交通大学附属第六人民医院神经外科 泰山医学院 上海交通大学附属第六人民医院四肢显微外科研究所 南昌大学第二附属医院神经外科

刊名

实验与检验医学

年份

2017

卷号

第35卷

期号

第2期

页码

143-147

ISSN

1674-1129

关键词

人胚胎干细胞源性间充质干细胞 外泌体 生物学特性

分类号

R329.2+8;R446.62

摘要

目的 探讨人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells,h ESCMSCs)来源的外泌体的生物学特性。方法 将已注册的未分化、人类ESC H9细胞系诱导成间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过旋转超滤法从培养基中提取外泌体(exosomes)。流式细胞分析技术鉴定h ESC-MSCs表面标志物,对间充质干细胞进行三系分化诱导,利用透射电镜、Izon q Nano纳米粒子分析系统观察外泌体的形态和大小,Western blotting鉴定外泌体表面特异性标志物,观察h ESC-MSCs-Exo对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMEC-1)增殖和迁移的影响。结果 成功诱导形成h ESC-MSCs,并收集纯化外泌体。诱导后的MSCs CD29、CD73、CD90、CD105、CD146、CD44表达阳性,CD34、CD133、CD45、HLA-DR-PE表达阴性;h ESC-MSCs通过诱导完成...更多

目的 探讨人胚胎干细胞源性间充质干细胞(human embryonic stem cell derived mesenchymal stem cells,h ESCMSCs)来源的外泌体的生物学特性。方法 将已注册的未分化、人类ESC H9细胞系诱导成间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过旋转超滤法从培养基中提取外泌体(exosomes)。流式细胞分析技术鉴定h ESC-MSCs表面标志物,对间充质干细胞进行三系分化诱导,利用透射电镜、Izon q Nano纳米粒子分析系统观察外泌体的形态和大小,Western blotting鉴定外泌体表面特异性标志物,观察h ESC-MSCs-Exo对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cells,HMEC-1)增殖和迁移的影响。结果 成功诱导形成h ESC-MSCs,并收集纯化外泌体。诱导后的MSCs CD29、CD73、CD90、CD105、CD146、CD44表达阳性,CD34、CD133、CD45、HLA-DR-PE表达阴性;h ESC-MSCs通过诱导完成成骨、成脂和成软骨分化;h ESCMSCs-Exo为粒径在40~100nm的囊泡,表达特异性的表面标志物CD9、CD63和CD81;体外促进HMEC-1的增殖和迁移。结论 h ESC-MSCs-Exo作为一种生物活性囊泡,能够促进血管内皮细胞的增殖和迁移;h ESC-MSCs-Exo来源无限,可为临床组织损伤的修复治疗提供丰富的干细胞外泌体来源。收起

基金

国家自然科学基金

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

39