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作者

辛永红 郏雁飞 蔡永君 刘强 汪运山

作者单位

中国重汽集团医院 泰山医学院临床学院济南市第四人民医院输血科 山东大学附属济南市中心医院医学实验诊断中心/山东省肿瘤防治靶向分子研究重点实验室

刊名

世界华人消化杂志

年份

2012

卷号

第20卷

期号

第25期

页码

2341-2346

ISSN

1009-3079

分类号

R329.28;R342.2;R394.2;R735.202.2;R977.9

摘要

目的:研究利用miRNA干扰技术抑制FUT3基因表达对人胃癌KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.方法:将前期实验构建成功的2对针对FUT3基因的特异性miRNA表达载体,用脂质体转染入人胃癌KATO-Ⅲ细胞,RT-PCR检测FUT3基因表达水平的变化;免疫细胞化学法、流式细胞术检测其合成抗原sLeA表达变化;MTT法、克隆形成实验检测FUT3基因的表达抑制对KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.结果转染FUT3-miRNA的2个干扰组FUT3基因mRNA相对表达量分别为0.41±0.01,0.36±0.02,明显低于对照组(0.71±0.05);空载体组(0.65±0.03,P<0.05);细胞表面合成抗原sLeA的表达水平,FUT3-miRNA1组为35.51%±0.36%,FUT3-miRNA2组为26.05%±1.14%,明显低于对照组(52.79%±2.62%)与空载体组(49.75%±1.29%,P<0.05);与对照组(5.60%±0.63%);空载体组(8.90%±0.91%)相比较,FUT3-miRNA1组(38.10%±1.96%);FUT3-miRNA2组(49.04%±...更多

目的:研究利用miRNA干扰技术抑制FUT3基因表达对人胃癌KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.方法:将前期实验构建成功的2对针对FUT3基因的特异性miRNA表达载体,用脂质体转染入人胃癌KATO-Ⅲ细胞,RT-PCR检测FUT3基因表达水平的变化;免疫细胞化学法、流式细胞术检测其合成抗原sLeA表达变化;MTT法、克隆形成实验检测FUT3基因的表达抑制对KATO-Ⅲ细胞增殖的影响.结果转染FUT3-miRNA的2个干扰组FUT3基因mRNA相对表达量分别为0.41±0.01,0.36±0.02,明显低于对照组(0.71±0.05);空载体组(0.65±0.03,P<0.05);细胞表面合成抗原sLeA的表达水平,FUT3-miRNA1组为35.51%±0.36%,FUT3-miRNA2组为26.05%±1.14%,明显低于对照组(52.79%±2.62%)与空载体组(49.75%±1.29%,P<0.05);与对照组(5.60%±0.63%);空载体组(8.90%±0.91%)相比较,FUT3-miRNA1组(38.10%±1.96%);FUT3-miRNA2组(49.04%±2.37%)能明显抑制细胞的增殖(P<0.05);细胞的克隆形成能力FUT3-miRNA1组(14.10%±1.70%);FUT3-miRNA2组(12.50%±1.96%),显著低于对照组(29.79%±3.05%);空载体组(28.92%±2.10%,P<0.05).结论FUT3靶向miRNA真核表达载体可有效抑制胃癌细胞的增殖能力.收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

27