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作者

李东娟

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

王家富，李伟

学位年度

2007

学位授予单位

泰山医学院

关键词

乔松素 蜂胶 黄酮 人脐静脉内皮细胞 脂多糖

分类号

R285

摘要

目的：采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells, HUVECs)活化,复制体外血管内皮细胞(vascul-ar endothelial cells, VECs)损伤模型,观察乔松素对损伤血管内皮细胞的影响,从而探讨乔松素对内皮细胞可能的保护作用及其机制,为蜂胶黄酮化合物抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)的作用提供理论依据。方法：1.胶原酶消化灌注法培养HUVECs。2.硅胶柱层析法和质谱法分离鉴定泰安柏树蜂胶中黄酮类化合物乔松素。3.建立人脐静脉血管内皮细胞脂多糖损伤模型。4.倒置显微镜下观察HUVECs的形态变化。5.MTT比色法观察乔松素对HUVECs活性的影响。6.酶联免疫双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中血管假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)含量。7.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-d...更多

目的：采用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells, HUVECs)活化,复制体外血管内皮细胞(vascul-ar endothelial cells, VECs)损伤模型,观察乔松素对损伤血管内皮细胞的影响,从而探讨乔松素对内皮细胞可能的保护作用及其机制,为蜂胶黄酮化合物抗动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)的作用提供理论依据。方法：1.胶原酶消化灌注法培养HUVECs。2.硅胶柱层析法和质谱法分离鉴定泰安柏树蜂胶中黄酮类化合物乔松素。3.建立人脐静脉血管内皮细胞脂多糖损伤模型。4.倒置显微镜下观察HUVECs的形态变化。5.MTT比色法观察乔松素对HUVECs活性的影响。6.酶联免疫双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中血管假血友病因子(von Willebrand factor,vWF)含量。7.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-deoxynucleotidyl Transferase mediated Nick End Labeling,TUNEL)检测HUVECs凋亡率。结果：1、MTT法观察HUVECs活性：模型组HUVECs活性低于对照组,有统计学意义(P<0.01)。100-200mg/L乔松素可抑制LPS诱导的HUVECs活性降低,与模型组比较有统计学意义(P<0.01),呈现一定的浓度和时间依赖趋势。2、ELISA法检测vWF含量：模型组vWF含量高于对照组,有统计学意义P<0.01)。不同浓度乔松素组vWF含量低于模型组,有统计学意义(P<0.01),呈现一定的浓度和时间依赖趋势。3、TUNEL法检测HUVECs凋亡率：模型组内皮细胞凋亡率高于对照组,不同浓度乔松素组HUVECs凋亡率低于模型组,有统计学意义(P<0.01)。结果呈现出一定的乔松素浓度和时间依赖趋势。4、乔松素与辛伐他汀钠联合用药：析因分析结果显示,乔松素或辛伐他汀钠单一药物预处理组与未用药物组比较,细胞活性增强、细胞凋亡率及vWF含量均降低,有统计学意义(P<0.01)；用乔松素和辛伐他汀钠联合预处理组与单一药物预处理组比较,细胞活性增强、细胞凋亡率及vWF含量均降低,有统计学意义(P<0.01)。各项指标A2水平和B2水平的均数之差均<A1水平和B1水平的均数之差,显示乔松素和辛伐他汀钠联合应用有协同作用。结论：1、用LPS可诱导HUVECs凋亡、vWF水平升高、HUVECs活性降低,成功复制了脐静脉内皮细胞损伤模型。2、乔松素可改善内皮细胞形态、增强HUVECs活性,降低vWF水平和脐静脉内皮细胞凋亡率,证明乔松素具有保护血管内皮细胞功能的作用。3、乔松素与辛伐他汀钠联合用药,对LPS诱导的血管内皮细胞损伤有协同保护作用。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

19