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作者

辛春雷

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

李光耀

学位年度

2007

学位授予单位

泰山医学院

关键词

海生素 凋亡 细胞周期 多药耐药

分类号

R733.7

摘要

目的： 探讨海生素对白血病细胞K562及其耐药细胞K562/ADM体外增殖的抑制作用，对K562及K562/ADM细胞凋亡和K562细胞周期的影响，对K562/ADM细胞耐药相关mdrl和Sorcin基因及其蛋白表达的影响。 方法： 采用MTT法测定海生素对K562及K562/ADM细胞的体外抑制作用，免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达，流式细胞仪测定细胞早期凋亡率、细胞周期和Pgp蛋白表达，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mdrl和Sorcin基因表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot检测Sorcin蛋白表达。 结果： 1、海生素在低浓度 0.1、1μg.ml时对K562细胞无生长抑制现象，细胞存活率分别为 96.23％、86.12％，而浓度为 10μg.ml时细胞存活率为68.46％，细胞数明显减少，在此浓度下随时间的延长细胞存活率有下降趋势。较大浓度100μg.ml时细胞大部分死亡。 2、海生素在低浓度0.1、1、10μg.ml时对K562/ADM细胞无生长抑制现象，海生素在浓度为40μ...更多

目的： 探讨海生素对白血病细胞K562及其耐药细胞K562/ADM体外增殖的抑制作用，对K562及K562/ADM细胞凋亡和K562细胞周期的影响，对K562/ADM细胞耐药相关mdrl和Sorcin基因及其蛋白表达的影响。 方法： 采用MTT法测定海生素对K562及K562/ADM细胞的体外抑制作用，免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达，流式细胞仪测定细胞早期凋亡率、细胞周期和Pgp蛋白表达，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mdrl和Sorcin基因表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot检测Sorcin蛋白表达。 结果： 1、海生素在低浓度 0.1、1μg.ml时对K562细胞无生长抑制现象，细胞存活率分别为 96.23％、86.12％，而浓度为 10μg.ml时细胞存活率为68.46％，细胞数明显减少，在此浓度下随时间的延长细胞存活率有下降趋势。较大浓度100μg.ml时细胞大部分死亡。 2、海生素在低浓度0.1、1、10μg.ml时对K562/ADM细胞无生长抑制现象，海生素在浓度为40μg.ml时，可有明显的细胞生长抑制现象，且随时间的延长生长抑制越明显，具有时效关系。 3、流式细胞仪检测发现海生素在浓度10μg.ml时可阻止K562细胞周期于G/S期。 4、海生素在20ug.ml浓度时，作用K562细胞12小时，流式细胞仪检测早期细胞凋亡率为(10.53±2.45)％与对照组(2.46±1.28)％比较p0.05)。 结论： 1、海生素可抑制K562和K562/ADM细胞生长； 2、海生素可影响bcl-2 和bax蛋白表达使 K562细胞生长周期停滞于G/S期； 3、海生素可通过下调bcl-2 蛋白表达、上调细胞bax蛋白表达，诱导细胞凋亡； 4、海生素可通过调节bcl-2及bax蛋白的表达影响细胞耐药； 5、海生素对耐药细胞mdrl基因的表达无影响，可下调耐药细胞Pgp蛋白表达； 6、海生素对Sorcin基因及其蛋白表达无影响。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

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