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作者

周欣

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

段耀奎

学位年度

2007

学位授予单位

泰山医学院

关键词

星形胶质细胞 脑微血管内皮细胞 血管内皮细胞生长因子 共培养

分类号

R741

摘要

目的：建立星形胶质细胞与脑微血管内皮细胞共培养模型，研究星形胶质细胞源性VEGF对脑微血管内皮细胞的影响。 方法：(1) 分离纯化 Wistar 大鼠大脑皮质星形胶质细胞 (astrocyte，Ast) 和脑微血管内皮细胞 (brain microvascular endothelial cell，BMEC)。GFAP 抗体免疫荧光和第八因子相关抗原(ⅧF-Ag) 免疫荧光分别鉴定。(2) 纯化的星形胶质细胞置于缺氧环境培养30min 后复氧，RT-PCR检测星形胶质细胞中 VEGFmRNA 的表达，并与正常培养的星形胶质细胞作对照。 (3)利用 Transwell 建立体外星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞共培养模型，观察星形胶质细胞源性VEGF对脑微血管内皮细胞迁移及LDH漏出率的影响。 结果：(1)获得了纯度分别是95％、90％的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞，符合实验要求。(2)正常培养的脑皮质星形胶质细胞有VEGF表达，但表达率较低。(3)缺氧/复氧后 VEGFmRNA 的表达增强，呈时间依赖性，8h 达高峰，与对照组相比有显著差别(PDH的漏出率，此作用可被sFlt...更多

目的：建立星形胶质细胞与脑微血管内皮细胞共培养模型，研究星形胶质细胞源性VEGF对脑微血管内皮细胞的影响。 方法：(1) 分离纯化 Wistar 大鼠大脑皮质星形胶质细胞 (astrocyte，Ast) 和脑微血管内皮细胞 (brain microvascular endothelial cell，BMEC)。GFAP 抗体免疫荧光和第八因子相关抗原(ⅧF-Ag) 免疫荧光分别鉴定。(2) 纯化的星形胶质细胞置于缺氧环境培养30min 后复氧，RT-PCR检测星形胶质细胞中 VEGFmRNA 的表达，并与正常培养的星形胶质细胞作对照。 (3)利用 Transwell 建立体外星形胶质细胞、脑微血管内皮细胞共培养模型，观察星形胶质细胞源性VEGF对脑微血管内皮细胞迁移及LDH漏出率的影响。 结果：(1)获得了纯度分别是95％、90％的星形胶质细胞和脑微血管内皮细胞，符合实验要求。(2)正常培养的脑皮质星形胶质细胞有VEGF表达，但表达率较低。(3)缺氧/复氧后 VEGFmRNA 的表达增强，呈时间依赖性，8h 达高峰，与对照组相比有显著差别(PDH的漏出率，此作用可被sFlt终止。 结论：慢性缺血性脑血管疾病常会伴随着血管新生，并受血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor VEGF) 调节。我们的研究显示：缺氧可明显诱导脑皮质星形胶质细胞表达VEGF。由于星形胶质细胞在神经元和脑微血管内皮细胞之间起着桥梁作用，一方面星形胶质细胞可通过足突作用于脑微血管内皮细胞上的VEGF受体，使脑微血管内皮细胞增生、迁移，微血管数量增加；另一方面，屋形胶质细胞可将VEGF释放到细胞外间隙，直接作用于神经元，发挥神经营养因子作用。同时，我们的结果也显示VEGF能够增加脑微血管内皮细胞的LDH的漏出率，提示VEGF可增强微血管的通透性，导致脑水肿的发生。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

29