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作者

魏萍 宋文刚 郝岗平

作者单位

泰山医学院基础医学部

刊名

微生物学通报

年份

2008

卷号

第11期

页码

1686-1690

ISSN

0253-2654

关键词

β-半乳糖苷酶 宏基因组 pwtsA 基因表达

分类号

Q78

摘要

从泰山土壤宏基因组文库中发现可能的β-半乳糖苷酶基因pwtsA,将其克隆到表达载体pET30a,转化E.coli BL21(DE3)。工程菌在IPTG诱导下高效表达可溶性的重组蛋白PWTSA,分子量为57 kD,与预期大小一致。PWTSA能够水解ONPG产生o-硝基酚,酶活力为13.6 U/mg,确证了重组蛋白为β-半乳糖苷酶。PWTSA的最适反应温度在85°C～95°C之间,最适pH值为6.5,对90°C左右的高温有很好的耐受力。在标准反应条件下,酶作用于底物ONPG的米氏常数Km为0.83 mmol/L。

基金

山东省医药卫生科技发展计划项目

文献类型

期刊

浏览量

27