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作者

周亚东

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

夏作理

学位年度

2006

学位授予单位

泰山医学院

关键词

脑梗死 局灶性脑缺血 细胞凋亡 白花丹参 免疫组化 细胞术检测

分类号

R282.71;R743

摘要

目的： 研究白花丹参水提物对大鼠脑梗死后神经细胞凋亡的影响，并初步探讨其机制。 方法： 雄性清洁级Wister大鼠192只，供体重240g～300g，由山东大学试验动物中心提供。首先随机选取大鼠120只，分为缺血组和假手术组，每组又分为3h、6h、12h、24h、48h共5个时间点，每时间点12只大鼠（6只用于TUNEL染色，6只用于流式细胞术检测），均采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型，并于术后规定时间处死。其余72只大鼠分为生理盐水对照组（n=18），药物预防组（n=54），药物预防组又分为白花丹参低剂量组（10g／kg体重）、中剂量组（20g／kg体重）、高剂量（40g／kg体重）三个剂量组，药物预防组动物于术前7d用白花丹参水提物灌胃，每天一次，持续一周，每剂量组18只动物（6只用于TTC染色，6只用于TUNEL染色和免疫组化，6只用于流式细胞术检测），应用TTC染色确定各组动物脑梗死体积，应用TUNEL染色和流式细胞术检测各组动物脑组织神经细胞凋亡水平，应用免疫组化检测bc1-2、bax、caspa，se-3表达水平。 结果： ...更多

目的： 研究白花丹参水提物对大鼠脑梗死后神经细胞凋亡的影响，并初步探讨其机制。 方法： 雄性清洁级Wister大鼠192只，供体重240g～300g，由山东大学试验动物中心提供。首先随机选取大鼠120只，分为缺血组和假手术组，每组又分为3h、6h、12h、24h、48h共5个时间点，每时间点12只大鼠（6只用于TUNEL染色，6只用于流式细胞术检测），均采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型，并于术后规定时间处死。其余72只大鼠分为生理盐水对照组（n=18），药物预防组（n=54），药物预防组又分为白花丹参低剂量组（10g／kg体重）、中剂量组（20g／kg体重）、高剂量（40g／kg体重）三个剂量组，药物预防组动物于术前7d用白花丹参水提物灌胃，每天一次，持续一周，每剂量组18只动物（6只用于TTC染色，6只用于TUNEL染色和免疫组化，6只用于流式细胞术检测），应用TTC染色确定各组动物脑梗死体积，应用TUNEL染色和流式细胞术检测各组动物脑组织神经细胞凋亡水平，应用免疫组化检测bc1-2、bax、caspa，se-3表达水平。 结果： 1．大鼠局灶性脑缺血后脑组织切片经TUNEL染色，3h组未见凋亡细胞，6h组在缺血侧脑组织尤其是半暗带区可见凋亡细胞，12h时凋亡细胞逐渐增多，24h达高峰，48h时凋亡水平稍下降。 2．大鼠局灶性脑缺血后24h脑组织标本可观察到白色梗死灶，梗塞灶位于额顶叶皮质以及皮质下白质（为大脑中动脉供血区），白花丹参低剂量组、中剂量组与生理盐水组比较梗死体积减小（p<0.05），白花丹参高剂量组与生理盐水组比较梗死体积明显减小（p＜0.01）。 3．TUNEL染色示白花丹参低剂量组与生理盐水组间神经细胞凋亡水平无显著差异（p＞0.05），白花丹参中剂量组比生理盐水组神经细胞凋亡水平降低（p＜0.05），白花丹参高剂量组比生理盐水组明显降低（p＜0.01）。白花丹参低、中、高三剂量组之间比较神经细胞凋亡水平无明显差异（p＞0.05）。 4．流式细胞术检测显示白花丹参低剂量组神经细胞凋亡率比生理盐水组减小（p＜0.05），中、高剂量组神经细胞凋亡率均比生理盐水组明显减小（p＜0.01）。白花丹参低、中、高三剂量组之间比较神经细胞凋亡率无明显差异（p＞0.05）。 5．免疫组化示白花丹参低剂量组bc1-2表达水平与生理盐水组无显著性差异（p＞0.05），白花丹参中、高剂量组bc1-2表达水平均比生理盐水组明显增高（p＜0.05）；白花丹参低剂量组bax表达水平与生理盐水组无显著性差异（p＞0.05），白花丹参中剂量、高剂量组bax表达水平均比生理盐水组明显降低（p＜0.05）；白花丹参低剂量组caspase-3表达水平与生理盐水组无显著性差异（p＞0.05），而白花丹参中剂量、高剂量组caspase-3表达水平均比生理盐水组明显降低（p＜0.05）。 结论： 预防性应用白花丹参水提物能有效降低脑梗死时的神经细胞凋亡水平，对凋亡线粒体途径（抑制bax的表达、刺激bc1-2的表达和抑制caspase-3的激活）的影响可能是其作用机制之一。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

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