鸡IL-2基因的扩增、表达及生物学活性鉴定
- 作者单位
- 泰山医学院基础部生物技术教研室 山东泰安 山东农业大学动物科技学院传染病实验室 山东泰安 山东农业大学动物科技学院传染病实验室
- 刊名
- 细胞与分子免疫学杂志
- 年份
- 2006
- 卷号
- 第22卷
- 期号
- 第5期
- 页码
- 591-594
- ISSN
- 1007-8738
- 分类号
- Q78
- 摘要
- 目的:扩增鸡IL2基因,并在大肠杆菌中表达及活性鉴定。方法:从ConA激活的AA肉鸡脾淋巴细胞中提取mRNA,以RTPCR法扩增鸡IL2cDNA,将其克隆到原核表达载体pGEX6P1中,构建重组质粒pGEXIL2。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达。并用淋巴细胞增殖试验及Westernblot检测表达产物的生物学活性。结果:以重组质粒转化大肠杆菌经IPTG诱导后,经SDSPAGE后薄层扫描分析证实,融合表达产物GSTIL2表达量占表达菌菌体总蛋白的30.8%。Westernblot分析表明,在相对分子质量(Mr)为42000处有一条特异性的带。经淋巴细胞增殖试验证实,该表达产物可明显增强淋巴细胞增殖。结论:鸡IL2基因在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物具有良好的生物学活性。
- 文献类型
- 期刊
- 浏览量
- 20