大鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的建立及其表型分析
- 刊名
- 细胞与分子免疫学杂志
- 年份
- 2007
- 卷号
- 第23卷
- 期号
- 第5期
- 页码
- 466-469
- ISSN
- 1007-8738
- 分类号
- Q813.1
- 摘要
- 目的探讨体外分离培养大鼠间充质干细胞(MSC)的方法,并对其进行表型鉴定及黏附分子测定。方法采用全骨髓直接贴壁法获得原代大鼠骨髓MSC,差速贴壁结合消化控制法纯化细胞,Ⅰ型胶原作为细胞外基质扩增MSC;镜下观察细胞生物学形态及生长状态,流式细胞仪检测第4代MSC的细胞周期,免疫细胞化学方法对其进行表型鉴定与细胞黏附分子检测。结果原代培养的MSC呈圆形、梭形、多角形等,24h内即可见少量细胞体壁伸展,7~8d左右可达90%融合,纯化扩增后的MSC呈均匀一致的长梭形,24h内细胞已基本贴壁,传代周期为5d左右。流式细胞术检测显示,第4代MSC约有80%处于G0/G1期。免疫细胞化学显示,MSCCD34、CD45表达阴性,CD29、CD105、CD166、VLA-4、P-selectin表达阳性。结论本实验方法能很容易地获得大量高纯度的MSC,并表达一定的黏附分子,为MSC进一步临床应用打下了良好的基础。
- 基金 山东省自然科学基金
- 学科
- 【教育部学科】工学
- 文献类型
- 期刊
- 浏览量
- 20
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