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作者

胡守彬 赵钦 赵菲菲 肖一红 周恩民

作者单位

西北农林科技大学动物医学院 山东农业大学动物医学院“泰山学者”免疫生物学实验室

会议名称

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十七次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十六次学术研讨会

会议录

中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十七次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十六次学术研讨会论文集

会议地点

陕西杨凌

召开年

2011

关键词

禽戊型肝炎 ORF3蛋白 单克隆抗体 制备实验 结构鉴定

分类号

S858.3

摘要

为获得禽戊型肝炎病毒中国分离株ORF3蛋白单克隆抗体，对其抗原表位进行分析。将ORF3及其分段基因分别克隆入pET-28a和pGEX6P-1中，在IPTG的诱导下进行表达，用SDS-PAGE和Western blot对表达的蛋白进行鉴定。将纯化的ORF3蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体，用间接ELISA和wbstern blot检测制备单抗识别的表位区域。用竞争ELISA方法检测所获得单抗的表位异同。结果表明成功表达了ORF3及其分段蛋白;筛选获得三株稳定分泌抗ORF3的杂交瘤细胞系，产生的单抗分别命名为6E9.3F3，2C9，IgG亚型分别为IgG1、IgG2b、IgG1;间接ELISA与westem bIot实验显示，三株单抗的抗原表位均位于ORF3蛋白C端74 aa-88aa，竞争ELISA实验显示，三株单抗识别的抗原表位不相同。本实验制备的单抗有较高生物学特性而且具有良好的应用价值，为进一步研究禽HEVORF3的蛋白结构和功能莫定了基础。

学科

【教育部学科】农学

文献类型

会议论文

浏览量

21