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作者

宋洪强 李雪芳 玄燕华 亓建洪

作者单位

泰山医学院运动医学研究所

刊名

中华实验外科杂志

年份

2016

卷号

第33卷

期号

第1期

页码

151-153

ISSN

1001-9030

关键词

半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 糖原合酶激酶-3beta beta-连环蛋白 关节软骨

摘要

目的体外培养保存关节软骨组织,探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3和Wnt/beta-连环蛋白 信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔,切取膝骨软骨柱100枚,随机分为5组。对照组:取材2 h内的新鲜软骨;实验组:分为4组,将软骨柱浸入MEME培养液中保存,第14、21、28、35天时各取一组检测指标。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素 细胞凋亡检测法测定凋亡率,Western blot检测Caspase-3、糖原合酶激酶-3beta表达,免疫组织化学法检测beta-catenin表达。结果随着保存 时间延长,软骨细胞凋亡率逐渐增加,Caspase-3、GSK-3beta表达逐渐上调,各组间差异均有统计学意义,各组软骨细胞凋亡 率为:对照组%、14 d%、21 d%、28 d%、35 d%, Caspase-3表达量为:0.078 0.032、0.193 0.026、0.327 0.041、0.510 0.023、0.719 0.063, GSK-3beta表达量为:0.162 0.025、0.242 0.019、0.493 0.012、0.717 0.0...更多

目的体外培养保存关节软骨组织,探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3和Wnt/beta-连环蛋白 信号通路中关键蛋白表达规律及其相关性。方法选取20只健康成年新西兰大白兔,切取膝骨软骨柱100枚,随机分为5组。对照组:取材2 h内的新鲜软骨;实验组:分为4组,将软骨柱浸入MEME培养液中保存,第14、21、28、35天时各取一组检测指标。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素 细胞凋亡检测法测定凋亡率,Western blot检测Caspase-3、糖原合酶激酶-3beta表达,免疫组织化学法检测beta-catenin表达。结果随着保存 时间延长,软骨细胞凋亡率逐渐增加,Caspase-3、GSK-3beta表达逐渐上调,各组间差异均有统计学意义,各组软骨细胞凋亡 率为:对照组%、14 d%、21 d%、28 d%、35 d%, Caspase-3表达量为:0.078 0.032、0.193 0.026、0.327 0.041、0.510 0.023、0.719 0.063, GSK-3beta表达量为:0.162 0.025、0.242 0.019、0.493 0.012、0.717 0.020、0.905 0.011;免疫组织化学结果显示,细胞质与细胞核中p-catenin阳性染色逐渐增强,组间差异有统计学意义;细胞凋亡率与Casp ase-3、GSK-3beta、beta-Catenin表达呈高度正相关; Caspase-3与GSK-3p、beta-catenin表达呈高度正相关。结论体外培养保存关节软骨组织过程中,软骨细胞凋亡伴有Wnt/beta-catenin信号通路关键蛋白be ta-catenin和GSK-3beta表达的显著上调。收起

文献类型

期刊

浏览量

16