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作者

孙佳芝 王新桐 刘雪慧 苗增民 刘志浩 王海荣 柴同杰

作者单位

山东农业大学动物科技学院 泰山医学院生命科学学院

刊名

中国兽医学报

年份

2014

卷号

第34卷

期号

第6期

页码

930

ISSN

1005-4545

关键词

产气荚膜梭菌 alpha毒素 单克隆抗体 多克隆抗体 双抗体夹心ELISA

摘要

为了对产气荚膜梭菌alpha毒素进行快速、有效的检测,本研究以单克隆抗体为基础,建立了双抗体夹心ELISA方法。纯化原核表达的alpha毒素蛋白为免疫原,制备腹水型mAb并分离纯化作为检测抗体,免疫新西兰大白兔制备抗a lpha毒素多克隆抗体纯化后作为捕获抗体,通过试验优化反应条件,建立标准曲线;并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。DAS-E LISA 方法对alpha毒素的有效检测范围为5.86~375 mug/L,最低检测线为4.57 mug/L,比多抗-多抗双夹心ELISA具有更高的特异性和敏感性。初步应用结果显示,相同培养条件下,A~E型产气荚膜梭菌标准菌株的培养上清中,a lpha毒素含量差异较大,A型菌中alpha毒素含量显著高于其他菌型。本研究成功制备了高特异性的mAb,并建立了特异、灵敏、稳 定的DAS-ELISA方法,为高效检测alpha毒素提供了有效工具。

文献类型

期刊

浏览量

15