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作者

邓鹏辉

学位名称

硕士

导师姓名

张才擎

学位年度

2018

学位授予单位

泰山医学院

关键词

布地奈德 哮喘 NF-κB TGF-β1 气道重塑

分类号

R562.25

摘要

研究目的探讨布地奈德干预对哮喘小鼠核转录因子、转化生长因子-β1、相关炎症因子表达及气道重塑的影响,进一步完善布地奈德治疗哮喘的理论支撑。研究方法取小鼠,随机分入3个组,10只/组,共计30只。布地奈德组和哮喘组中各小鼠分别在第1、8和15天腹腔注射鸡卵清蛋白抗原混合液致敏,第15天用5%OVA雾化吸入连续雾化六周,一天一次,每次计30min。对布地奈德组和哮喘组OVA诱导,进行哮喘模型的建立,布地奈德组每次行OVA雾化时,预先2小时给予10ml布地奈德雾化吸入干预,而对照组运用0.9%生理盐水替代。3组小鼠肺组织HE染色后于显微镜下观察各组病理改变;留取各分组小鼠肺泡灌洗夜,并对其中细胞分别做分类与计数处理;3组小鼠BALF中的相关白细胞介素、白介素-4、白介素-5)水平行ELISA法进行测定;采取Western blot及Real-time PCR法对各组小鼠肺组织中NF-κB p65,TGF-β1的蛋白表达及mRNA的表达分别定量分析;将支气管管腔的周长、支气管管壁面积、支气管管壁平滑肌面积及平滑肌细胞计数采取医学图像采集系统和分析软件进行处理分析,并对处理结果Pbm标准化。研究...更多

研究目的探讨布地奈德干预对哮喘小鼠核转录因子、转化生长因子-β1、相关炎症因子表达及气道重塑的影响,进一步完善布地奈德治疗哮喘的理论支撑。研究方法取小鼠,随机分入3个组,10只/组,共计30只。布地奈德组和哮喘组中各小鼠分别在第1、8和15天腹腔注射鸡卵清蛋白抗原混合液致敏,第15天用5%OVA雾化吸入连续雾化六周,一天一次,每次计30min。对布地奈德组和哮喘组OVA诱导,进行哮喘模型的建立,布地奈德组每次行OVA雾化时,预先2小时给予10ml布地奈德雾化吸入干预,而对照组运用0.9%生理盐水替代。3组小鼠肺组织HE染色后于显微镜下观察各组病理改变;留取各分组小鼠肺泡灌洗夜,并对其中细胞分别做分类与计数处理;3组小鼠BALF中的相关白细胞介素、白介素-4、白介素-5)水平行ELISA法进行测定;采取Western blot及Real-time PCR法对各组小鼠肺组织中NF-κB p65,TGF-β1的蛋白表达及mRNA的表达分别定量分析;将支气管管腔的周长、支气管管壁面积、支气管管壁平滑肌面积及平滑肌细胞计数采取医学图像采集系统和分析软件进行处理分析,并对处理结果Pbm标准化。研究结果1.模型制作结果表明,哮喘组小鼠和布地奈德组的小鼠经OVA处理以后,呈现出不同程度的急性哮喘发作的症状体征,并且哮喘组小鼠哮喘症状跟布地奈德组小鼠相比,更加严重,正常对照组则无明显异常的改变,整个实验过程中各组小鼠均没有死亡。2.各组的ELISA检测结果为:BALF中相关白细胞介素在布地奈德组对比对照组则上升,但要低于哮喘组;BALF中各类细胞计数结果与上述结果一致。3组间的比较显示差异有统计学意义。3.各组的肺组织HE染色结果为,哮喘组对比布地奈德组两组都有不同严重程度的气道周围炎症细胞浸润、黏膜下水肿、气管腔壁狭窄及增厚等病理特点,且哮喘组更为严重,对照组上述指标无显著性的改变。4.各组的Western blot实验结果为,NF-κB p65与TGF-β1的蛋白在布地奈德组的含量对比对照组则上升,但要低于哮喘组,3组间的比较显示差异有统计学意义。5.各组的Real-time PCR实验结果为NF-κB p65与TGF-β1的mRNA在布地奈德组肺组织的表达对比对照组则上升,但要低于哮喘组,3组间的比较显示差异统计学意义。6.图像软件分析结果显示布地奈德组WAt/Pbm、WAm/Pbm、N/Pbm较哮喘组有明显改善,较对照组高,差异有统计学意义。研究结论1.在哮喘小鼠肺组织中NF-κB、TGF-β1蛋白及两者mRNA表达均偏高,并可能参与到哮喘发生和发展的病理过程中。2.NF-κB/TGF-β1通路在哮喘致病的机制中可能是一关键环节,并可能对哮喘气道重塑产生影响,而经布地奈德干预后,减弱了NF-κB p65与TGF-β1在小鼠肺组织中的表达,其治疗哮喘可能机制之一是对信号通路NF-κB/TGF-β1信号通路进行抑制,从而使哮喘的症状和气道重塑得以改善。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

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