重组质粒pcDNA3.1-P6-gBCTL-TB K-1的免疫效果评价

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摘要: 目的:观察以TBK-1为分子佐剂的重组质粒pc-P6-gBCTL-TBK-1的免疫效果.方法:将构建的真核表达质粒pc-P6-gBCTL-TBK-1转染HeLa细胞瞬时表达,Western blotting验证融合蛋白的表达.将重组质粒肌内注射免疫接种BALB/c小鼠,分别于第0、2、4周免疫接种3次,第5周采集免疫小鼠的眼眶静脉血,第8周处死小鼠后无菌分离小鼠脾脏.ELISA法检测免疫小鼠血清的特异性抗HSV-2gD-P6抗体滴度、γ干扰素、白细胞介素-18、白细胞介素-4和白细胞介素-6的浓度,MTT法检测脾淋巴细胞的增殖率,乳酸脱氢酶法检测细胞毒性T淋巴细胞的活性.结果:以TANK binding kinasc-1为分子佐剂的重组质粒可刺激机体产生特异性的抗HSV-2gD-P6抗体,诱导分泌较高水平的IFN-γ、IL-4和IL-18,并能促进小鼠脾淋巴细胞的增殖和增强CTL活性.结论:构建的HSV-2DNA疫苗pc-P6-gBCTL-TBK-i具有一定的免疫原性,能诱导产生一定强度的细胞免疫和体液免疫,TBK-1具有良好的分子伴侣作用.

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