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作者

高英华 孙雯雯 靳凯宇 翟晓茜 谢浩 张毅芳 安霞 张亚 田伟 刘蕾 柳雅玲

作者单位

山东医药技术学院生物工程系 山东第一医科大学第二附属医院妇科 山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院 山东第一医科大学第二附属医院呼吸与危重症医学科 山东第一医科大学附属省立医院妇科 山东第一医科大学第二附属医院病理科 福建省立医院南院病理科

刊名

山东医药

年份

2023

卷号

第25期

ISSN

1002-266X

关键词

子宫内膜癌 缺氧 雌激素 上皮间充质转化 缺氧诱导因子1α

摘要

目的 探讨缺氧环境下外源性雌激素对子宫内膜癌细胞上皮间充质转化的影响及其机制。方法 选择雌激素受体阳性的子宫内膜癌细胞Ishikawa，体外传代培养。取传3代、对数生长期、生长状态良好的Ishikawa细胞进行后续实验。取部分Ishikawa细胞，于0.5% O、5% CO、94.5% N环境中缺氧预处理2 h，随机分为siRNA-缺氧诱导因子1α组与siRNA-NC组、HIF-1α过表达组与Control组，siRNA-HIF-1α组、siRNA-NC组、HIF-1α过表达组分别转染siRNA-HIF-1α、siRNA-NC、HA-HIF-1α-pcDNA3，Control组不予转染；另取部分Ishikawa细胞，于0.5% O、5% CO、94.5% N环境中缺氧预处理2 h后加入0.01 μmol/L β-雌二醇，随机分为Estrogen组、Estrogen +siRNA-NC组、Estrogen + siRNA-HIF-1α组以及Control组、Estrogen + HIF-1α过表达组，Estrogen + siRNA-NC组、Estrogen + siRNA-HIF-1α...更多

目的 探讨缺氧环境下外源性雌激素对子宫内膜癌细胞上皮间充质转化的影响及其机制。方法 选择雌激素受体阳性的子宫内膜癌细胞Ishikawa，体外传代培养。取传3代、对数生长期、生长状态良好的Ishikawa细胞进行后续实验。取部分Ishikawa细胞，于0.5% O、5% CO、94.5% N环境中缺氧预处理2 h，随机分为siRNA-缺氧诱导因子1α组与siRNA-NC组、HIF-1α过表达组与Control组，siRNA-HIF-1α组、siRNA-NC组、HIF-1α过表达组分别转染siRNA-HIF-1α、siRNA-NC、HA-HIF-1α-pcDNA3，Control组不予转染；另取部分Ishikawa细胞，于0.5% O、5% CO、94.5% N环境中缺氧预处理2 h后加入0.01 μmol/L β-雌二醇，随机分为Estrogen组、Estrogen +siRNA-NC组、Estrogen + siRNA-HIF-1α组以及Control组、Estrogen + HIF-1α过表达组，Estrogen + siRNA-NC组、Estrogen + siRNA-HIF-1α组、Estrogen + HIF-1α过表达组分别转染siRNA-NC、siRNA-HIF-1α、HA-HIF-1α-pcDNA3。转染24 h，收集各组细胞，分别采用实时荧光定量PCR法、Western blotting法检测HIF-1α及EMT相关基因mRNA和蛋白表达。结果 与siRNA-NC组比较，siRNA-HIF-1α组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β mRNA和蛋白相对表达量均降低，E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均升高；与Control组比较，HIF-1α过表达组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β mRNA和蛋白相对表达量均升高，E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均降低。Estrogen + siRNA-HIF-1α组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β mRNA和蛋白相对表达量均低于Estrogen + siRNA-NC组和Estrogen组，E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均高于Estrogen + siRNA-NC组和Estrogen组；Estrogen + HIF-1α过表达组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β mRNA和蛋白相对表达量均高于Estrogen组和Control组，E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均低于Estrogen组和Control组。结论 缺氧环境下外源性雌激素可能通过激活HIF-1α来促进子宫内膜癌细胞EMT。收起

文献类型

期刊

浏览量

17