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作者

孟姿秀

学位名称

硕士

导师姓名

侯海峰

学位年度

2020

学位授予单位

山东第一医科大学

关键词

黄绿青霉素 食管鳞癌 细胞凋亡 细胞增殖

分类号

R994.4;R735.1

摘要

目的 黄绿青霉素是一种毒性真菌次级代谢产物，在一些研究中发现具有抗癌作用。食管鳞状细胞癌是亚洲地区高发的主要的食管癌组织学亚型，本实验通过体外培养食管鳞癌细胞并进行一系列实验，观察食管鳞癌中黄绿青霉素对人食管癌细胞ECA-109的增殖和凋亡作用。 方法 1．实验选用人食管癌细胞ECA109细胞株，进行体外培养，将CIT经过计算后配制成不同浓度对细胞染毒。 2．采用MTT法用酶标仪对人食管癌细胞活性进行检测，用浓度不同的CIT浸染作用不同时长，观察CIT对细胞的影响。 3．通过EdU法观察不同浓度CIT对人食管癌细胞活性的影响。 4．对于凋亡调节蛋白和周期蛋白的表达，检测方法选用免疫印迹法。 结果 1．CIT对细胞增殖有抑制作用，随着浓度的升高和时间的增加抑制作用越明显。 2．随CIT的浓度逐渐升高，细胞的增殖逐渐受到抑制，细胞凋亡增多。 3．凋亡调节蛋白表达量的检测结果显示，Bax随CIT浓度增加而升高，Bcl-2随CIT浓度增加而下降。通过分析发现，CIT高剂量组的变化更加明显。 4．周期调节蛋白表达量随CIT浓度的升高而逐渐降低。 5．用不同浓度的CIT处理ECA-109细胞，对c...更多

目的 黄绿青霉素是一种毒性真菌次级代谢产物，在一些研究中发现具有抗癌作用。食管鳞状细胞癌是亚洲地区高发的主要的食管癌组织学亚型，本实验通过体外培养食管鳞癌细胞并进行一系列实验，观察食管鳞癌中黄绿青霉素对人食管癌细胞ECA-109的增殖和凋亡作用。 方法 1．实验选用人食管癌细胞ECA109细胞株，进行体外培养，将CIT经过计算后配制成不同浓度对细胞染毒。 2．采用MTT法用酶标仪对人食管癌细胞活性进行检测，用浓度不同的CIT浸染作用不同时长，观察CIT对细胞的影响。 3．通过EdU法观察不同浓度CIT对人食管癌细胞活性的影响。 4．对于凋亡调节蛋白和周期蛋白的表达，检测方法选用免疫印迹法。 结果 1．CIT对细胞增殖有抑制作用，随着浓度的升高和时间的增加抑制作用越明显。 2．随CIT的浓度逐渐升高，细胞的增殖逐渐受到抑制，细胞凋亡增多。 3．凋亡调节蛋白表达量的检测结果显示，Bax随CIT浓度增加而升高，Bcl-2随CIT浓度增加而下降。通过分析发现，CIT高剂量组的变化更加明显。 4．周期调节蛋白表达量随CIT浓度的升高而逐渐降低。 5．用不同浓度的CIT处理ECA-109细胞，对caspase-3、PARP蛋白的条带进行分析，两个蛋白的活化条带均未发现有明显表达。 结论 1．CIT能够对细胞的增殖产生影响，抑制ECA-109细胞的增殖，抑制作用随CIT浓度的升高越发明显。 2．CIT能够推动细胞发生凋亡，CIT对人食管癌细胞的影响存在着剂量-效应关系，凋亡作用随CIT浓度的升高越明显。 3．CIT作用下诱导的细胞凋亡不是通过Caspases级联反应介导的。收起

文献类型

学位论文

浏览量

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