一种基于碱基编辑器的丝状真菌连续进化方法及其应用
- 作者单位
- 71016 山东省泰安市高新技术开发区长城路619号
- 申请人
- 山东第一医科大学(山东省医学科学院)
- 申请日期
- 2024.07.22
- 申请号
- 202410983217.2
- 摘要
- 本发明公开了一种基于碱基编辑器的丝状真菌连续进化方法及其应用,针对A.nidulans ATCC58396中的46个天然产物基因簇核心基因设计sgRNA,利用胞嘧啶编辑器nCas9‑CBE靶向功能和特定位点的胞嘧啶C到胸腺嘧啶T的转变,实现终止密码子的引入和核心基因失活;建立同时表达5个sgRNA的组合文库,并将该文库与CRISPR‑nCas9‑CBE对A.nidulans ATCC58396进行六轮连续转化和迭代进化,用于众多天然产物合成基因的突变。本发明设计的基于碱基编辑器的连续进化技术可以在棘白霉素B生产菌株构巢曲霉中实现众多副产物合成关键基因失活,减少了菌株副产物的生产。
- 文献类型
- 专利
- 浏览量
- 8
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