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发明人

卢志明 成士清 童书青 刘美辰 段佳志 董雯

作者单位

50021 山东省济南市经五纬七路324号

申请人

山东第一医科大学附属省立医院(山东省立医院)

申请日期

2024.12.20

申请号

202411889249.2

摘要

本发明公开了一种突变基因、重组蛋白、质粒、重组菌及制备方法和应用，属于肌酐酶生产技术领域。本发明将 Pseudomonas putida 来源的肌酐酶基因序列的CDS进行密码子优化，识别优化后的基因序列翻译的酶活性位点，通过对活性位点基因序列进行突变，提升肌酐酶翻译后的整体催化活性。将突变后的基因序列插入到初始质粒中以构建重组质粒，将重组质粒转入大肠杆菌即可制备重组菌。本发明构建的重组菌，极大增加了发酵过程中肌酐酶的产量和酶活性，通过两步纯化即可获得高纯度的重组肌酐酶，可有助于降低成本，对开发肾功能精细检测试剂具有重要意义。

文献类型

专利

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3