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作者

李思嘉 张安心 徐新然 尹文兵

作者单位

²中国科学院微生物研究所微生物多样性与资源创新利用重点实验室 ¹山东第一医科大学生物医学科学学院

刊名

中国抗生素杂志

年份

2025

卷号

第50卷

期号

第9期

页码

1116-1123

ISSN

1001-8689

关键词

绿僵菌素 生物合成 异源表达 构巢曲霉 非核糖体多肽合成酶 细胞色素P450

分类号

R978.1

摘要

目的 在丝状真菌构巢曲霉中异源生产绿僵菌素类化合物，为建立绿色高效的生物合成方法奠定基础。方法 在罗伯茨绿僵菌基因组中PCR扩增绿僵菌素生物合成基因dtxS1和dtxS2的DNA序列，利用酵母组装法构建异源表达载体，通过PEG介导的原生质体转化法将载体导入构巢曲霉LO8030底盘菌中。利用乙酸乙酯萃取转化子培养物并获得粗提物，利用LC-MS确定绿僵菌素类化合物的分子量。结果 参与绿僵菌素生物合成的非核糖体多肽合成酶基因dtxS1和细胞色素P450基因dtxS2可以直接在丝状真菌构巢曲霉底盘菌中异源表达。由于底盘菌中存在绿僵菌素生物合成基因簇中dtxS3和dtxS4的同源序列，故仅表达dtxS1和dtxS2就能产生绿僵菌素类化合物，且其种类多于罗伯茨绿僵菌野生型产生的。结论 丝状真菌构巢曲霉可成功异源表达绿僵菌素生物合成基因dtxS1和dtxS2，并产生一系列绿僵菌素类化合物。

基金

国家自然科学基金

文献类型

期刊