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作者

陈婷 陈学红 纪凌云 陈前 王伟

作者单位

³山东第一医科大学附属省立医院 ⁴山东中医药大学附属医院 ²临沂城市职业学院 ¹山东中医药大学中医学院

刊名

时珍国医国药

年份

2025

卷号

第24期

页码

4656-4663

ISSN

1008-0805

关键词

五加减正气散 轮状病毒 PI3K/AKT/mTOR信号通路 自噬

分类号

R285.5

摘要

目的 探讨五加减正气散对轮状病毒感染的Caco-2 细胞中PI3K/AKT/mTOR 通路的调控作用，并研究对染毒细胞自噬的影响。方法 首先确定RV感染与细胞自噬之间的关系，利用自噬流试剂盒以及透射电镜技术探究轮状病毒感染以后Caco-2细胞的自噬情况，同时，qRT-PCR 技术研究RV基因组VP7、NSP3的表达情况以研究细胞自噬与RV复制之间的关系。制备含药血清，再次利用自噬流和透射电镜技术观测加入五加减正气散含药血清Caco-2细胞的自噬水平，观测PI3K、p-AKT、p-mTOR 蛋白和mRNA 的水平以及ATG5、ATG12mRNA。结果 在RV 感染的初期Caco-2 细胞的自噬逐渐增强，在6h时自噬水平开始下降；加入3-甲基腺嘌呤以后RV 基因组的NSP3和VP7水平显著降低；与空白对照组相比，RV 组的PI3K、p-AKT、p-mTOR 的蛋白和相关mRNA 水平显著抑制；五加减正气散含药血清进行干预后，各剂量组的自噬程度均显著弱于RV 组；与RV 组比较，RV+H 组、RV+M 组、RV+L 组的ATG5、ATG12 mRNA 的表达水平显著降低，PI3K、p-AKT...更多

目的 探讨五加减正气散对轮状病毒感染的Caco-2 细胞中PI3K/AKT/mTOR 通路的调控作用，并研究对染毒细胞自噬的影响。方法 首先确定RV感染与细胞自噬之间的关系，利用自噬流试剂盒以及透射电镜技术探究轮状病毒感染以后Caco-2细胞的自噬情况，同时，qRT-PCR 技术研究RV基因组VP7、NSP3的表达情况以研究细胞自噬与RV复制之间的关系。制备含药血清，再次利用自噬流和透射电镜技术观测加入五加减正气散含药血清Caco-2细胞的自噬水平，观测PI3K、p-AKT、p-mTOR 蛋白和mRNA 的水平以及ATG5、ATG12mRNA。结果 在RV 感染的初期Caco-2 细胞的自噬逐渐增强，在6h时自噬水平开始下降；加入3-甲基腺嘌呤以后RV 基因组的NSP3和VP7水平显著降低；与空白对照组相比，RV 组的PI3K、p-AKT、p-mTOR 的蛋白和相关mRNA 水平显著抑制；五加减正气散含药血清进行干预后，各剂量组的自噬程度均显著弱于RV 组；与RV 组比较，RV+H 组、RV+M 组、RV+L 组的ATG5、ATG12 mRNA 的表达水平显著降低，PI3K、p-AKT、p-mTOR 蛋白表达以及PI3K、AKT、mTOR mRNA 水平显著下降。结论 五加减正气散通过调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制RV的复制，同时这种抑制作用可能与干预了染毒细胞的自噬进程有关。收起

基金

国家自然科学基金;山东省自然科学基金

文献类型

期刊

浏览量

5