高效液相色谱-荧光检测法测定胰腺癌荷瘤小鼠中7种硫酸软骨素二糖含量及与EGFR的相互作用分析

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摘要: 建立了一种柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定胰腺癌PANC-1、 CFPAC-1细胞荷瘤小鼠中7种硫酸软骨素二糖含量的方法。胰腺肿瘤样本经匀浆、脱脂、蛋白酶酶解、硫酸软骨素酶酶解等前处理得到CS二糖，以2-氨基吖啶酮为衍生剂，通过XBridge Shield RP18色谱柱分离。结果表明，在优化的色谱分离条件下，7种CS二糖标准品在各自的质量浓度范围内线性关系良好，检出限为0.01～0.08µg/mL，定量限为0.025～0.2µg/mL，相对标准偏差为0.50%～1.4%，日内稳定性RSD为0.01%～0.09%，日间稳定性RSD为0.09%～0.21%。生物样本结果表明，肿瘤组织中的CS二糖含量均高于胰腺正常组织，并且PANC-1和CFPAC-1细胞荷瘤小鼠肿瘤组织中，∆UA, 2S-GalNAc占比最高，分别为2043.42 nmol/g和762.89 nmol/g，∆UA-GalNAc, 4S, 6S和∆UA-GalNAc占比次之。∆UA-GalNAc，∆UA, 2S-GalNAc，∆UA-GalN...

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