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作者

马腾

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

孙玉萍

学位年度

2012

学位授予单位

泰山医学院

关键词

乳腺癌 IL-18 IL-10 NSCLC

分类号

R737.9

摘要

在我国，乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，其发病率逐年上升，严重威胁着女性的生命健康。尽管乳腺癌的手术、化疗、放疗以及内分泌治疗已经取得长足进展，但是对于晚期转移的患者却没有有效的治疗手段。随着分子生物学、细胞免疫学研究的进展，生物免疫治疗已经成为一种新的治疗手段。IL-18是1995年Okamura发现的，它常以非活性的前体方式存在,只有经过白细胞介素1-β转化酶(Interleukin1-beita converting enzyme,ICE)的剪切后,才能发挥生物学活性。IL-18在结构上与IL-1相似,具有IL-1特征性的结构F-X(12)-F-X-S-X(6)-F-L序列，两者前体分子N-端都没有疏水信号肽序列，而是一段无功能的前导序列。功能研究显示，IL-18的功能与IL-12相似,可以诱导生成IFN-γ，具有较强的免疫调节生物学活性，并能参与抵抗病毒、寄生虫等病原微生物的胞内感染。有研究表明，转染IL-18基因的肿瘤细胞株PG在同基因鼠内的致瘤性下降,动物存活期延长,也有部分细胞株如AsPC-1细胞转染IL-18基因后致瘤性没有产生任何改变,转染细胞的成瘤速度与野生型相同。然...更多

在我国，乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，其发病率逐年上升，严重威胁着女性的生命健康。尽管乳腺癌的手术、化疗、放疗以及内分泌治疗已经取得长足进展，但是对于晚期转移的患者却没有有效的治疗手段。随着分子生物学、细胞免疫学研究的进展，生物免疫治疗已经成为一种新的治疗手段。IL-18是1995年Okamura发现的，它常以非活性的前体方式存在,只有经过白细胞介素1-β转化酶(Interleukin1-beita converting enzyme,ICE)的剪切后,才能发挥生物学活性。IL-18在结构上与IL-1相似,具有IL-1特征性的结构F-X(12)-F-X-S-X(6)-F-L序列，两者前体分子N-端都没有疏水信号肽序列，而是一段无功能的前导序列。功能研究显示，IL-18的功能与IL-12相似,可以诱导生成IFN-γ，具有较强的免疫调节生物学活性，并能参与抵抗病毒、寄生虫等病原微生物的胞内感染。有研究表明，转染IL-18基因的肿瘤细胞株PG在同基因鼠内的致瘤性下降,动物存活期延长,也有部分细胞株如AsPC-1细胞转染IL-18基因后致瘤性没有产生任何改变,转染细胞的成瘤速度与野生型相同。然而，也有研究发现，IL-18可以通过上调fasL表达水平，诱导其周围fas阳性的细胞凋亡，而有利于癌细胞在机体内定位，并促使肿瘤细胞识别杀伤性CTL，导致CTL凋亡增多和攻击力下降，从而起到促进肿瘤增长的作用，而且肿瘤及宿主产生的IL-18可以促进肿瘤的发生，血管的生成，及癌细胞的转移。此外，IL-18还参与变态反应及抗真菌过程。在临床研究中发现，一些恶性肿瘤患者的血清中IL-18的水平明显升高，且与预后不良有关。以往的研究显示，IL-18的在肿瘤免疫中的作用具有双面性，既有促进免疫应答，抑制肿瘤生长的作用，也有抑制免疫应答，促进肿瘤生长的作用。IL-10是1989年Fiorentino发现的一种分子量约为35-40kD的蛋白质。它的活性形式是非共价键连接的寡二聚体形式。IL-10是由Th2分泌的一种多功能的细胞因子，在调控细胞免疫应答、抑制促炎症因子分泌过程中发挥着重要作用。IL-10可以抑制活化的T细胞特别是Th1细胞产生细胞因子IL-2、IFN-γ，抑制CTL细胞、NK细胞等效应细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，抑制DC等抗原呈递细胞的抗原提呈作用及激活免疫调节T细胞产生免疫耐受。研究也发现，乳腺癌血清中IL-10的水平明显高于正常人,并与乳腺癌患者的一些预后不良指标相关。目前关于IL-18在肿瘤组织中表达情况的研究报道尚少。本实验应用免疫组织化学方法检测IL-18在104例乳腺癌患者组织标本中的表达情况，并分析它与临床病理参数之间的关系，及与免疫抑制细胞因子IL-10的关系，探讨其在乳腺癌发病及进展中的作用,为乳腺癌的发病提供新的理论依据。目的：检测乳腺癌组织中IL-18的表达，探讨其与临床病理参数之间的关系，及与免疫抑制细胞因子IL-10的关系。方法：应用免疫组织化学Elivision二步法检测104例乳腺癌组织及31例乳腺纤维腺瘤组织中IL-18的表达情况，分析其与临床病理参数之间的关系，及与免疫抑制细胞因子IL-10的关系。结果：1．IL-18在人乳腺癌组织中的表达：在组织切片上，IL-18的表达呈弥漫性，其阳性染色部位主要位于细胞膜及细胞浆，为棕黄色颗粒；其在癌组织中阳性表达率为75.00%（78/104）；在乳腺纤维腺瘤组织中也有表达，其阳性表达率为19.4%（6/31），两者相比，有显著性差异（P<0.05）。2．IL-10在人乳腺癌组织中的表达：在组织切片上，IL-10的表达同IL-18一样呈弥漫性，其阳性染色部位主要位于细胞质，为棕黄色颗粒；其在乳腺癌组织中的阳性表达率为78.80%(82/104)；在乳腺纤维腺瘤组织中也有表达，其阳性表达率为22.6%（7/31），两者相比，有显著性差异（P<0.05）。提示IL-10、IL-18的阳性表达与乳腺组织的恶性转化及癌变相关。3．IL-18与IL-10在人乳腺癌癌组织中表达的相关性：IL-18在组织切片上的阳性表达区域与IL-10的表达区域相一致。在78例阳性表达的乳腺癌组织中70例表达IL-10，两者在表达程度上具有明显的相关性(r2=0.284,p<0.05)。4．IL-18和IL-10的表达与临床参数的关系：IL-18和IL-10的表达水平与淋巴结转移相关，淋巴结转移组中IL-18和IL-10的表达明显高于无淋巴结转移组（IL-18：P=0.035；IL-10：P=0.047）。而与患者的年龄，肿瘤大小，病理分级，ER，PR和HER-2表达等临床病理参数均无相关性。结论：乳腺癌组织中IL-18在肿瘤细胞中高表达，其表达与IL-10的表达呈正相关，且两者亦与乳腺癌的淋巴结转移呈正相关，而与患者的年龄、组织学类型、分化程度、TNM分期、ER、PR和HER-2/neu均无相关性。提示IL-18可能是乳腺癌的一个预后不良因子，通过与IL-10的协调作用，抑制机体的免疫反应，使肿瘤细胞发生免疫逃避，从而促进肿瘤的发生发展。原发性肺癌为当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率都呈逐年上升趋势，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占80%，已经严重威胁到人类的生命健康。目前，肺癌的治疗方法包括传统的手术、化疗、放疗和新近发展起来的免疫、基因等疗法，但患者的生存率尤其是出现转移的患者5年生存率仍然很低。当机体内发生肿瘤时，肿瘤细胞可以凭借多种机制逃避机体免疫系统的监视从而生长、分裂和增殖。因此，需要发现治疗肿瘤的新手段。随着现代医学的发展与进步，生物免疫治疗已成为一种新的治疗手段。IL-18是1995年Okamura发现的细胞因子。IL-18由单核吞噬细胞或一些上皮细胞产生,在结构上与IL-1相似,具有IL-1特征性结构F-X(12)-F-X-S-X(6)-F-L序列，由于缺乏分泌蛋白所具有的信号肽,故常以前体形式表达于巨噬细胞、T细胞、B细胞等表面,但在Caspase-1和其他酶的作用下,可以转变为具有生物学活性的分子。有功能研究显示，IL-18与IL-12一起协调激活T细胞、NK细胞产生γ-干扰素,能够吸附白细胞向肿瘤间质浸润,在肿瘤局部免疫方面起着重要作用。然而，也有研究发现，IL-18可以通过上调fasL表达水平，促使肿瘤细胞识别杀伤性CTL，导致CTL凋亡增多和攻击力下降，从而起到促进肿瘤增长的作用，而且肿瘤及宿主产生的IL-18可以促进肿瘤的发生，血管的生成，及癌细胞的转移。IL-10是一种单链糖蛋白,有Th2细胞分泌产生，少数TH0细胞、CD8+T细胞、活化的B胞、Kufpper细胞及肝星状细胞(HSC)也可以产生。IL-10有许多重要的生物学活性，它是维持细胞因子网络平衡的重要调节机制。IL-10是已经被确认的一种有助于下调免疫调解反应的抑制因子，它能强烈地抑制Th1细胞产生IL-2、TNF-α及INF-γ，抑制T细胞的增殖及其细胞因子的产生。有研究发现，IL-18及IL-10参与多种疾病的发生发展过程，如感染，自身免疫性疾病等。非小细胞肺癌血清中IL-18及IL-10表达水平明显高于正常人，有研究认为血清IL-18及IL-10可以作为非小细胞肺癌患者预后不良的指标。目前关于IL-18在肿瘤组织中表达情况的研究报道尚少。本实验应用免疫组织化学方法检测IL-18在82例NSCLC患者组织标本中的表达情况，并分析它与临床病理参数之间的关系，及与免疫抑制细胞因子IL-10的关系，探讨其在NSCLC发病及进展中的作用，为NSCLC的发病提供新的理论依据。目的:检测NSCLC组织中IL-18的表达情况，并分析它与临床病理参数之间的关系，及与免疫抑制细胞因子IL-10的关系。方法:应用免疫组织化学Elivision二步法检测82例NSCLC组织及20例癌旁正常肺组织中IL-18的表达情况，并分析它与临床病理参数之间的关系，及与免疫抑制细胞因子IL-10的关系。结果：1.IL-18在人NSCLC组织中的表达：组织切片上，IL-18的表达呈弥漫性，其阳性染色部位主要位于肿瘤细胞细胞膜及细胞浆，为棕黄色颗粒；癌旁正常肺组织也有表达；阳性表达率分别为73.10%（60/82）和15%（3/20）（P<0.05）。2. IL-10在人NSCLC组织中的表达：组织切片上，IL-10的表达呈弥漫性，其阳性染色部位主要位于肿瘤细胞的胞质和胞膜，为棕黄色颗粒；间质中的淋巴细胞也有表达。肿瘤细胞的阳性表达率为65.85%(54/82)，20例癌旁正常肺组织中3例有表达，IL-10在癌细胞上的表达显著高于癌旁正常肺组织（P<0.05）。3. IL-18与IL-10在人NSCLC癌组织中的表达的相关性：IL-18在组织切片上的阳性表达区域与IL-10的表达区域相一致。在阳性表达的NSCLC组织中，50例表达IL-10，两者在表达程度上具有明显的相关性，r2=0.443,P＜0.05。4. IL-18和IL-10在人NSCLC癌组织中的表达与临床参数的关系： NSCLC患者IL-10与IL-18的表达与分化程度和淋巴结转移有关：低分化组（IL-18：P=0.043；IL-10：P=0.033；）和淋巴结转移组（IL-18：P=0.033；IL-10：P=0.043；）中，IL-18与IL-10的阳性表达率明显增高；而与患者的年龄、性别、肿瘤大小等临床病理参数无相关性。结论：NSCLC组织中IL-18在肿瘤细胞中高表达，其表达与IL-10的表达呈正相关，且两者亦与NSCLC的淋巴结转移和分化程度相关，而与患者的年龄、组织学类型、TNM分期均无相关性。提示IL-18可能是NSCLC的一个预后不良因子，通过与IL-10的协调作用，抑制机体的免疫反应，使肿瘤细胞发生免疫逃避，从而促进肿瘤的发生发展。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

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