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作者

乔坤

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

邹跃

学位年度

2011

学位授予单位

泰山医学院

关键词

肺癌 树突状细胞 凋亡 照射 疫苗

分类号

R392

摘要

目的肺癌作为全球范围内对人们健康威胁最大的肿瘤之一,辐射及化学药物诱导细胞死亡(包括细胞凋亡和坏死)是目前已十分明确的一种治疗癌症的重要手段。近年来,随着免疫学的发展,已有研究表明,以高温、射线等手段处理肿瘤细胞引起其死亡的同时,肿瘤细胞表面表达可以引起机体免疫攻击的蛋白分子,启动免疫系统从而引起抗肿瘤免疫反应。通过研究以辐射诱导的方法制备能被DC更好利用的肿瘤抗原,观察并评价射线是否具有增强DC诱导的特异性CTL的抗肿瘤作用,以明确射线诱导细胞死亡与免疫应答之间的相互作用过程及发生机制,为探索辐射联合生物治疗恶性肿瘤的新模式提供实验依据。方法1、体外利用PBMC联合应用rhIL-4和rhGM-CSF培养树突状细胞DC,并用流式细胞仪检测细胞表型。2、采用Annexin-V-FITC/PI法检测体外不同剂量X线照射后A549细胞凋亡率。3、不同浓度的抗原冲击未成熟DC,加入TNF-α促使imDC成熟,成熟后DC诱导T细胞产生特异性杀伤作用杀伤肿瘤细胞。4、不同方法体外杀伤肿瘤细胞。5、采用ELISA酶联免疫吸附实验检测各实验组培养上清液中IL-12、IL-2、IFN-γ分泌水平。结果1...更多

目的肺癌作为全球范围内对人们健康威胁最大的肿瘤之一,辐射及化学药物诱导细胞死亡(包括细胞凋亡和坏死)是目前已十分明确的一种治疗癌症的重要手段。近年来,随着免疫学的发展,已有研究表明,以高温、射线等手段处理肿瘤细胞引起其死亡的同时,肿瘤细胞表面表达可以引起机体免疫攻击的蛋白分子,启动免疫系统从而引起抗肿瘤免疫反应。通过研究以辐射诱导的方法制备能被DC更好利用的肿瘤抗原,观察并评价射线是否具有增强DC诱导的特异性CTL的抗肿瘤作用,以明确射线诱导细胞死亡与免疫应答之间的相互作用过程及发生机制,为探索辐射联合生物治疗恶性肿瘤的新模式提供实验依据。方法1、体外利用PBMC联合应用rhIL-4和rhGM-CSF培养树突状细胞DC,并用流式细胞仪检测细胞表型。2、采用Annexin-V-FITC/PI法检测体外不同剂量X线照射后A549细胞凋亡率。3、不同浓度的抗原冲击未成熟DC,加入TNF-α促使imDC成熟,成熟后DC诱导T细胞产生特异性杀伤作用杀伤肿瘤细胞。4、不同方法体外杀伤肿瘤细胞。5、采用ELISA酶联免疫吸附实验检测各实验组培养上清液中IL-12、IL-2、IFN-γ分泌水平。结果1、联合应用rhIL-4、rhGM-CSF与TNF-α。使用健康人外周血可诱导培养出成熟DC,细胞具有树突状细胞的典型形态,经流式检测证实获得的细胞为成熟DC。2、A549细胞在一定照射剂量范围内,凋亡率随照射剂量的增加而升高。3、采用不同浓度的抗原冲击未成熟DC,其成熟后诱导T细胞产生特异性杀伤肿瘤细胞的能力有所不同。DC与抗原浓度比为1:10-1时DC诱导的CTL作用最强(0.2446±0.0490, P<0.01)。4、辐射联合组与对照组、单纯照射组、无抗原组、冻融组相比可以更好的杀伤肿瘤细胞(p<0.01)。5、联合组培养上清液中IL-12、IL-2、IFN-γ明显高于对照组(P<0.01)。结论辐射诱导肿瘤细胞凋亡联合DC介导的免疫应答以清除肿瘤细胞的方法,能有效的激活免疫效应细胞发挥作用,诱导免疫调节分子表达等一系列反应,并创造适宜的抗肿瘤微环境,从而达到更确切的杀伤肿瘤的效果,成为治疗肺癌的一条新途径。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

25