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作者

刘瑞宝

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

张立成

学位年度

2010

学位授予单位

泰山医学院

关键词

肝肿瘤/免疫学 疾病模型 T淋巴细胞亚群 消融 流式细胞仪 病理变化 生存期

分类号

R735.7

摘要

目的研究微波消融(Microwave Ablation,MWA)联合重组人白介素-2(Recombinant Human Interleukin-2,rhIL-2)治疗小鼠H22移植性肝癌的作用与机制。并进一步临床应用MWA联合rhIL-2治疗肝癌,观察评价其疗效、可行性和安全性,为肝癌治疗提供新的选择。方法建立小鼠H22皮下移植肝癌模型,随机分为对照组、单纯MWA组、单纯rhIL-2治疗组和微波消融联合rhIL-2治疗组共4组,每组30只。MWA组小鼠在接种后第8天,给予70w,60s微波消融治疗1次。rhIL-2治疗组接种后第8-14天,连续7天在小鼠腹部皮下注射rhIL-2,1000U/次,共7次。联合组接受MWA组与rhIL-2治疗组所有过程。对照组不接受治疗。各组随机取15只小鼠,治疗前1天开始隔日测量肿瘤体积,检测各组肿瘤生长速度,第21天取小鼠外周血后处死小鼠,剥离肿瘤称重,计算各治疗组抑瘤率,摘除小鼠胸腺、脾脏称重,计算小鼠胸腺及脾脏指数,利用流式细胞技术测定各组小鼠外周血T细胞亚群水平。肿瘤标本经苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)及免疫组化(Im...更多

目的研究微波消融(Microwave Ablation,MWA)联合重组人白介素-2(Recombinant Human Interleukin-2,rhIL-2)治疗小鼠H22移植性肝癌的作用与机制。并进一步临床应用MWA联合rhIL-2治疗肝癌,观察评价其疗效、可行性和安全性,为肝癌治疗提供新的选择。方法建立小鼠H22皮下移植肝癌模型,随机分为对照组、单纯MWA组、单纯rhIL-2治疗组和微波消融联合rhIL-2治疗组共4组,每组30只。MWA组小鼠在接种后第8天,给予70w,60s微波消融治疗1次。rhIL-2治疗组接种后第8-14天,连续7天在小鼠腹部皮下注射rhIL-2,1000U/次,共7次。联合组接受MWA组与rhIL-2治疗组所有过程。对照组不接受治疗。各组随机取15只小鼠,治疗前1天开始隔日测量肿瘤体积,检测各组肿瘤生长速度,第21天取小鼠外周血后处死小鼠,剥离肿瘤称重,计算各治疗组抑瘤率,摘除小鼠胸腺、脾脏称重,计算小鼠胸腺及脾脏指数,利用流式细胞技术测定各组小鼠外周血T细胞亚群水平。肿瘤标本经苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)及免疫组化(Immuno-histochemistry,IH)染色后,观察肿瘤标本病理及局部免疫细胞变化。各组剩余15只小鼠,不处死,用于观察各组小鼠治疗后自然生存期。67例符合条件肝癌患者按住院号数的单、双号随机分成联合治疗组(MWA联合rhIL-2治疗组)32例、对照组(单纯MWA组)35例。对照组只给予微波消融1-2次,联合组微波消融后当日开始皮下注射rhIL-2,20万U/日,共14次。观察疼痛反应和皮肤烧伤、胃肠穿孔等并发症发生情况,以评价其安全性及可行性,动态观察治疗前后症状、体重、Karnofsky评分等变化情况,检测肝功能、甲胎蛋白、肝脏CT、生存期等指标,评价其有效性。结果不同治疗组小鼠体内肿瘤生长速度和重量不同。单纯MWA组、单纯rhIL-2治疗组、联合治疗组肿瘤质量均小于对照组,P<0.01,抑瘤率分别为29.03%、39.39%、67.40%。各治疗组小鼠胸腺及脾脏指数均较对照组升高,P<0.05。治疗后小鼠外周血T细胞亚群发生变化,经方差分析,各组间用SNK(Student-Newman-Keuls)检验,联合治疗组与rhIL-2治疗组外周血CD3+T淋巴细胞较对照组均升高,P<0.01。接受治疗小鼠与对照组小鼠相比,外周血中CD4+T淋巴细胞升高,联合治疗组、单纯治疗组和对照组之间差异均有统计学意义,P<0.01,CD8+T淋巴细胞则降低,各治疗组和对照组之间差异均有统计学意义,P<0.05。CD4+/CD8+比值各组之间差异均有统计学意义,P<0.01。与对照组相比,各治疗组小鼠外周血NK细胞均增高,各组之间均具有显著性差异,P<0.01。不同治疗组小鼠局部病理及免疫细胞浸润情况不同,对照组可见较多分裂增殖旺盛肿瘤细胞,微波治疗组则可见广泛细胞凝固性坏死,rhIL-2治疗组分裂增殖肿瘤细胞较对照组少,联合组兼有微波治疗组、rhIL-2治疗组特点。免疫组化染色显示各治疗组CD4+T淋巴细胞较对照组增多,CD8+T淋巴细胞则较对照组少。不同治疗组小鼠生存期不同,各治疗组生存期均较对照组延长。67例肝癌患者均未出现烧伤、大出血、胃肠穿孔等并发症。联合治疗组和单纯MWA组0.5、1、2年的生存率分别为：84.38%、62.50%、28.13%和74.29%、37.14%、14.29%,其0.5、1、2年累计复发率分别为：15.63%、28.13%、59.38%和22.86%、54.29%、83.86%。结论微波消融联合rhIL-2治疗安全、有效、可行,可提高小鼠全身及局部抗肿瘤免疫力。微波消融联合rhIL-2用于肝癌的治疗,效果明显,可延长患者生存时间,降低复发率。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

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