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作者

朱靖 窦如海 金东庆 杨娜娜

作者单位

山东省实验动物中心 泰山医学院

刊名

实验动物与比较医学

年份

2008

卷号

第28卷

期号

第5期

页码

318-320

ISSN

1674-5817

关键词

鸡胚胎成纤维细胞 EGFP基因 真核表达载体

分类号

Q78

摘要

目的研究pSecTag真核表达载体转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件,从而为研究目的基因在鸡胚胎成纤维细胞中成功表达奠定基础。方法用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切、连接、转化的方法构建了pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,设计优化试验,通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞,用Bradford检测法检测正交优化不同组合细胞培养液中所表达分泌的增强绿色荧光蛋白的相对含量。结果成功构建pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,并选出该质粒转染鸡胚胎成纤维细胞的最佳转染条件,即脂质体加2μl、质粒加1.0μg。结论脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞。

文献类型

期刊

浏览量

27