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作者

杨娜娜 史卫峰 崔英杰 赵晓民 杜立新

作者单位

中国农业科学院畜牧研究所　　山东泰安 泰山医学院生命科学研究所　　山东泰安

刊名

泰山医学院学报

年份

2007

卷号

第28卷

期号

第8期

页码

586-588

ISSN

1004-7115

关键词

真核表达载体 鸡胚胎成纤维细胞 增强绿色荧光蛋白 脂质体 转染

分类号

Q78

摘要

目的构建含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的分泌型真核表达载体pSecTag-EGFP,用以研究pSecTag/HygroB转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,为目的基因的成功表达奠定基础。方法用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切、连接、转化构建pSecTag-EGFP分泌型真核表达载体,设计优化实验,通过脂质体介导的方法转染鸡胚胎成纤维细胞,在荧光显微镜下直接观察该基因的表达。用B radford法检测不同组合的细胞培养液中的EGFP蛋白的相对含量。结果脂质体介导的方法能有效转染鸡胚胎成纤维细胞,实验中EGFP蛋白相对表达量随质粒量的增加而明显升高(P

文献类型

期刊

浏览量

32