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作者

孙林英 刘畅 胡锋涛 刘秀丽 邵晓婷 刘端祺 谭晓华

作者单位

滕州市级索中心卫生院 北京军区总医院血液科 泰山医学院医学检验系 北京军区总医院肿瘤诊疗中心

刊名

华北国防医药

年份

2008

卷号

第20卷

期号

第4期

页码

5-7，104

ISSN

2095-140X

关键词

受体 血管内皮生长因子 质粒 基因表达调控

分类号

R349.8

摘要

目的:利用基因工程技术构建pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)重组质粒,为其应用于肿瘤的基因治疗奠定基础。方法:以本实验室构建保存的pcDNA3.1 hKDR为模板,PCR扩增hKDR(Ig1-3)cDNA片段后用Nco I和Xho I酶切后插入pmRNA IRES多克隆位点的相应位点中,经PCR、酶切和测序鉴定其序列正确性,然后用试剂盒体外转录出相应的mRNA,用脂质体转染COS-7细胞,经G418筛选后通过免疫组化和Western blot检测该融合蛋白。结果:PCR、酶切和测序证实pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)构建成功,体外转录出相应的mRNA,免疫组化和Western blot检测出其蛋白表达。结论:成功构建含pmRNA IRES-hKDR(Ig1-3)的真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用。

基金

国家自然科学基金;北京市自然科学基金

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

16