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作者

李陪 董智雄 朱长军 刘海燕

作者单位

泰山医学院附属医院 天津师范大学生命科学学院天津市动植物抗性重点实验室

刊名

国际生物医学工程杂志

年份

2013

卷号

第1期

页码

1-4，8

ISSN

1673-4181

关键词

RNA干扰 esiRNA文库 KIF4A

分类号

Q

摘要

目的建立KIF4A核糖核酸内切酶Ⅲ酶切制备的小分子干扰RNA文库,并探讨这种新型siRNA制备方法的优势。方法制备502 bp的KIF4A基因组序列作为转录模板;体外转录获得双链RNA;用核糖核酸内切酶ⅢGST融合蛋白酶切双链RNA,制备KIF4A esiRNA文库;应用KIF4A esiRNA和化学合成的KIF4A siRNA转染胃癌细胞株SGC-7901,应用Q-RT PCR和WesternBlot分别检测KIF4A的mRNA和蛋白水平。结果利用GST-RNaseⅢ成功制备了KIF4A esiRNA文库,该文库可有效抑制SGC-7901细胞内的KIF4A表达,且抑制效果明显优于化学合成的KIF4A siRNA。结论用生物学方法制备的KIF4A esiRNA文库可有效抑制KIF4A在细胞内的表达,且抑制效果优于化学合成的siRNA。

基金

国家自然科学基金;教育部新世纪优秀人才支持计划

学科

【教育部学科】理学

文献类型

期刊

浏览量

25