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作者

师声 张静 胡岳 刘义庆 褚福禄 兰文军

作者单位

齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院 山东第一医科大学附属省立医院临床医学检验部

刊名

齐鲁工业大学学报

年份

2022

卷号

第5期

ISSN

1004-4280

关键词

多重引物等位基因识别 结直肠癌 锁核酸 RAS

分类号

Q754

摘要

RAS突变的检测为指导结直肠癌的预测和预后提供了有力的工具。探讨一种简洁、低成本的用于检测KRAS基因突变的多重引物等位基因识别方法。利用不对称扩增和含锁定核酸的等位基因特异性引物、以及共同的反向引物和探针,进行多重孔检测和参考孔检测,以多重检测和参考检测的扩增循环数值差来判定结果。同时使用福尔马林固定石蜡包埋组织样本或在野生型基因组DNA背景下混合质粒进行非临床性能评价,并采用Kappa检验比较MPAD与Sanger测序的结果一致性。该方法对KRAS热点突变检测灵敏度至少为3%；凝胶电泳也验证了方法的特异性；重现性的变异系数AD法与Sanger测序结果之间无统计学差异(k>0.9；pAD方法可以简洁、低成本地检测KRAS热点突变。

文献类型

期刊

浏览量

17