猪肝中戊型肝炎病毒检测方法的比较

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摘要: 目的对猪肝中戊型肝炎病毒核酸检测方法进行优化和比较，为动物内脏标本中HEV检测提供技术参考。方法分别采用三种方法对人工污染HEV粪便悬液的猪肝标本进行前处理和病毒核酸提取，通过HEV RT-qPCR检测，比较HEV回收率、抑制率。将筛选出的最优的HEV检测方法应用于市售猪肝检测，对检出的阳性标本进行HEV基因分型。结果PBS匀浆处理法、蛋白酶K处理法、氯仿抽提法的HEV回收率分别为9.88%、0.19%和17.28%。蛋白酶K处理法的回收率小于1%，舍弃该方法，对其他两种方法进行t检验，结果表明两种方法回收率的差异具有统计学意义，氯仿抽提法的回收率较高。三种方法的抑制率均小于75%，在ISO/TS 15216-2∶2019标准的范围内。在192份市售猪肝标本中检出17份HEV RNA阳性标本，核酸阳性率为8.85%，其中5份标本HEV基因分型成功，均为基因4型。结论用氯仿抽提法对猪肝进行前处理，病毒回收效果较好，且在市售猪肝标本中检出HEV核酸阳性标本，该方法可用于食品中病毒的检测。

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