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作者

应振栋 陈长军 陈带领 王秋入 刘启彬 马清伟 张磊 康鹏德 赵鑫

作者单位

山东第一医科大学附属省立医院骨科 山东第二医科大学山东省千佛山医院骨外科 山东中医药大学第二临床医学院（山东省千佛山医院）骨外科 四川大学华西医院骨外科 山东第一医科大学第一附属医院（山东省千佛山医院）骨外科

刊名

中华骨科杂志

年份

2025

卷号

第45卷

期号

第18期

页码

1208-1216

ISSN

0253-2352

关键词

间充质干细胞 糖皮质激素 衰老 凋亡 成骨分化 激素性股骨头坏死

摘要

目的探讨高剂量地塞米松对骨髓间充质干细胞成骨分化能力、细胞衰老及衰老相关分泌表型的产生和细胞凋亡的持续性影响及其调控机制。方法提取原代大鼠BMSCs，将其与高剂量地塞米松共培养后停药，分析地塞米松组和空白对照成骨标志物骨碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2在基因和蛋白表达水平；检测β-半乳糖苷酶染色阳性率，分析衰老相关标志物、SASP[转化生长因子-α、白细胞介素-1β和干扰素-γ]、凋亡相关蛋白以及Nrf2/HO-1信号通路在基因和蛋白表达水平，评估BMSCs的衰老状态、凋亡特征及成骨分化的改变。结果qRT-PCR、Western-blot结果表明高剂量地塞米松处理-停药后，bALP和Runx2在基因及蛋白水平的表达降低；地塞米松组β-半乳糖苷酶染色阳性率为74.33%±6.89%，高于对照组的20.30%±1.57%，差异有统计学意义。qRT-PCR结果示高剂量地塞米松处理-停药后BMSCs的P16和P21基因表达水平增高；免疫荧光分析显示P21蛋白表达水平升高；Western-blot结果示地塞米松组BMSCs中P16、P21蛋白表达水平分别为7.025±0.255和6.362±0...更多

目的探讨高剂量地塞米松对骨髓间充质干细胞成骨分化能力、细胞衰老及衰老相关分泌表型的产生和细胞凋亡的持续性影响及其调控机制。方法提取原代大鼠BMSCs，将其与高剂量地塞米松共培养后停药，分析地塞米松组和空白对照成骨标志物骨碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2在基因和蛋白表达水平；检测β-半乳糖苷酶染色阳性率，分析衰老相关标志物、SASP[转化生长因子-α、白细胞介素-1β和干扰素-γ]、凋亡相关蛋白以及Nrf2/HO-1信号通路在基因和蛋白表达水平，评估BMSCs的衰老状态、凋亡特征及成骨分化的改变。结果qRT-PCR、Western-blot结果表明高剂量地塞米松处理-停药后，bALP和Runx2在基因及蛋白水平的表达降低；地塞米松组β-半乳糖苷酶染色阳性率为74.33%±6.89%，高于对照组的20.30%±1.57%，差异有统计学意义。qRT-PCR结果示高剂量地塞米松处理-停药后BMSCs的P16和P21基因表达水平增高；免疫荧光分析显示P21蛋白表达水平升高；Western-blot结果示地塞米松组BMSCs中P16、P21蛋白表达水平分别为7.025±0.255和6.362±0.456，高于对照组的1.016±0.115和0.816±0.172，差异均有统计学意义。qRT-PCR示地塞米松组TNF-α和IL-1β的基因表达水平分别为3.539±0.599和4.469±0.331，高于对照组的0.742±0.095和0.799±0.175；Western-blot验证蛋白表达水平增加，差异均有统计学意义。地塞米松组TNF-α、IL-1β和IFN-γ蛋白表达水平高于对照组，差异均有统计学意义。Western-blot结果显示地塞米松组Nrf2和HO-1的蛋白表达水平分别为0.21±0.07和0.19±0.06，低于对照组1.13±0.15和0.92±0.21，差异有统计学意义；地塞米松组BMSCs中促凋亡蛋白Bax及Cleaved-Caspase-3表达水平较对照组高，抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平低，差异均有统计学意义。结论高剂量地塞米松处理-停药后可通过抑制Nrf2/HO-1信号通路诱导BMSCs衰老改变并增加衰老相关分泌表型表达，同时通过激活线粒体凋亡通路增加BMSCs的凋亡而抑制BMSCs成骨分化。收起

基金

山东省自然科学基金

文献类型

期刊

浏览量

11