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作者

王艳

作者单位

泰山医学院

学位名称

硕士

导师姓名

苏衍萍

学位年度

2013

学位授予单位

泰山医学院

关键词

亚硒酸钠 胃癌 凋亡 线粒体 Cytc Bax/Bcl-2

分类号

R735.2

摘要

目的研究亚硒酸钠诱导人胃癌SGC-7901细胞株凋亡过程中线粒体膜电位的变化、线粒体Cytc的释放和Bax/Bcl-2表达，探讨线粒体凋亡途径在亚硒酸钠诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法人胃癌SGC-7901细胞株分为空白对照组、2.5、5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组，各浓度亚硒酸钠作用24h、48h后，罗丹明123荧光探针染色后流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化；免疫细胞化学SABC法检测亚硒酸钠对Cytc分布、Bax/Bcl-2表达的影响；Western blot印迹法检测亚硒酸钠对细胞质Cytc和线粒体Cytc、Bax/Bcl-2蛋白含量的影响。结果流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化结果显示：24h、48h随着亚硒酸钠浓度的增加，线粒体膜电位逐渐降低（P<0.05）。在同一时间点上，5.0μmol/L、10μmol/L亚硒酸钠组膜电位的下降程度明显高于2.5μmol/L亚硒酸钠组。免疫细胞化学SABC法检测Cytc蛋白分布和Western blot印迹法检测细胞质Cytc和线粒体Cytc含量变化结果分别显示：亚硒酸钠能够提高胃癌SGC-7901细胞中Cy...更多

目的研究亚硒酸钠诱导人胃癌SGC-7901细胞株凋亡过程中线粒体膜电位的变化、线粒体Cytc的释放和Bax/Bcl-2表达，探讨线粒体凋亡途径在亚硒酸钠诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的作用。方法人胃癌SGC-7901细胞株分为空白对照组、2.5、5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组，各浓度亚硒酸钠作用24h、48h后，罗丹明123荧光探针染色后流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化；免疫细胞化学SABC法检测亚硒酸钠对Cytc分布、Bax/Bcl-2表达的影响；Western blot印迹法检测亚硒酸钠对细胞质Cytc和线粒体Cytc、Bax/Bcl-2蛋白含量的影响。结果流式细胞技术检测线粒体膜电位的变化结果显示：24h、48h随着亚硒酸钠浓度的增加，线粒体膜电位逐渐降低（P<0.05）。在同一时间点上，5.0μmol/L、10μmol/L亚硒酸钠组膜电位的下降程度明显高于2.5μmol/L亚硒酸钠组。免疫细胞化学SABC法检测Cytc蛋白分布和Western blot印迹法检测细胞质Cytc和线粒体Cytc含量变化结果分别显示：亚硒酸钠能够提高胃癌SGC-7901细胞中Cytc的表达，24h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Cytc蛋白的免疫细胞染色的平均光密度值（MOD）明显增强（P<0.05）；48h时各亚硒酸钠组与对照组相比Cytc蛋白的免疫细胞染色的MOD明显增强（P<0.05）；Western blot印迹法结果为24h、48h各亚硒酸钠组与对照组相比细胞质Cytc蛋白表达量逐渐升高（P<0.05），线粒体Cytc蛋白表达量逐渐降低（P<0.05）。同一时间点上，随着亚硒酸钠浓度的增高Cytc蛋白的MOD逐渐升高，细胞质Cytc蛋白表达强度逐渐增强，线粒体Cytc蛋白表达强度逐渐减弱。免疫细胞化学SABC法和Western blot印迹法检测Bax蛋白表达的结果分别显示：亚硒酸钠能够提高胃癌SGC-7901细胞中Bax蛋白免疫细胞化学染色的MOD，24h时10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bax蛋白的免疫细胞染色的MOD明显增强（P<0.05）；48h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bax蛋白的免疫细胞染色的MOD明显增强（P<0.05）。Western blot印迹法结果为24h、48h各亚硒酸钠组与对照组相比蛋白表达量明显升高（P<0.05）。在同一时间点上，随着亚硒酸钠浓度的增高Bax蛋白MOD逐渐升高、蛋白表达强度逐渐增强。免疫细胞化学SABC法和Western blot印迹法检测Bcl-2蛋白表达结果分别显示：亚硒酸钠能够降低胃癌SGC-7901细胞中Bcl-2蛋白免疫细胞化学染色的MOD，24h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bcl-2蛋白的免疫细胞染色的MOD明显减弱（P<0.05）；48h时5.0、10.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组相比Bcl-2蛋白的免疫细胞染色的MOD明显减弱（P<0.05）。Western blot印迹法检测结果为24h、48h各亚硒酸钠组与对照组相比蛋白表达量明显降低（P<0.05）。在同一时间点上，随着亚硒酸钠浓度的增高Bcl-2蛋白MOD逐渐降低、蛋白表达强度逐渐减弱。结论亚硒酸钠可能通过降低线粒体膜电位，促进Cytc从线粒体释放到细胞质，调节Bax/Bcl-2基因表达，通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

学位论文

浏览量

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