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作者

王海霞 陈爱芳 张晓伟 张汝建

作者单位

271000 泰山医学院附属医院传染科 泰山医学院附属医院特检科 泰山医学院附属医院消化科

刊名

肝脏杂志

年份

2008

卷号

第13卷

期号

第3期

页码

234-235

ISSN

1008-1704

关键词

大鼠肝细胞 分离 生物型人工肝支持系统 肝细胞移植 肝细胞培养 培养技术 实验结果

分类号

R575

摘要

如何获得足够数量的肝细胞并保持良好的活性和功能是目前研究肝细胞移植及生物型人工肝支持系统的难题。由于分离、培养技术的差异很大,实验结果难以稳定。为此,我们比较了几种分离大鼠肝细胞的方法,探索一种可靠的方法以促进肝细胞培养在肝病研究领域的开展与应用。材料与方法一、材料成年雄性SD大鼠60只,体重(250±50)g,购自本校动物中心。IV型胶原酶购自美国Sigma公司,其余试剂均来自国内分析纯。二、方法60只SD大鼠按速记数字表随机分为4组,每组15只,分别采用门静脉插管原位灌注结合胶原酶消化法(A法)、门静脉插管离体灌注结合胶原酶消化法(B法)、体外二步灌流法(C法)及剪切消化法(D法)分离大鼠肝细胞并比较肝细胞得数和活性。(一)门静脉插管原位灌注结合胶原酶消化法[1]氯铵酮2.4ml/kg肌肉注射麻醉,常规消毒皮肤,在严格无菌操作下,开腹、分离肌肉层,剪开前腹膜,将静脉留置针置入门静脉以细线固定,连接于蠕动棒,结扎门静脉,37℃预热无钙无镁的Hank′s液灌流至肝脏表面呈淡黄色后,0.05%的IV型胶原酶灌流肝脏10~15min至肝表面呈“龟背状”裂隙,按压肝脏表面失去弹性时,钝性分离...更多

如何获得足够数量的肝细胞并保持良好的活性和功能是目前研究肝细胞移植及生物型人工肝支持系统的难题。由于分离、培养技术的差异很大,实验结果难以稳定。为此,我们比较了几种分离大鼠肝细胞的方法,探索一种可靠的方法以促进肝细胞培养在肝病研究领域的开展与应用。材料与方法一、材料成年雄性SD大鼠60只,体重(250±50)g,购自本校动物中心。IV型胶原酶购自美国Sigma公司,其余试剂均来自国内分析纯。二、方法60只SD大鼠按速记数字表随机分为4组,每组15只,分别采用门静脉插管原位灌注结合胶原酶消化法(A法)、门静脉插管离体灌注结合胶原酶消化法(B法)、体外二步灌流法(C法)及剪切消化法(D法)分离大鼠肝细胞并比较肝细胞得数和活性。(一)门静脉插管原位灌注结合胶原酶消化法[1]氯铵酮2.4ml/kg肌肉注射麻醉,常规消毒皮肤,在严格无菌操作下,开腹、分离肌肉层,剪开前腹膜,将静脉留置针置入门静脉以细线固定,连接于蠕动棒,结扎门静脉,37℃预热无钙无镁的Hank′s液灌流至肝脏表面呈淡黄色后,0.05%的IV型胶原酶灌流肝脏10~15min至肝表面呈“龟背状”裂隙,按压肝脏表面失去弹性时,钝性分离肝脏,除去肝包膜及明显肝...收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

27