血清淀粉样蛋白P与血浆脂蛋白作用机制的研究

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摘要: 目的探讨人血清中淀粉样蛋白P(SAP)与血浆脂蛋白中HDL、VLDL和LDL相互作用机制.方法①Sepharose 4B(Pharmacia)亲和层析法提取人血清SAP,DEAE-Sepharose层析纯化.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与标准SAP(Sigma)检测.采用免疫探针生物素化试剂盒(Sigma)以1:10比例接合于生物素氨基己酸-N-羟基-硫琥珀酰亚胺酯.得到生物素-SAP.②VLDL、LDL、HDL用超速离心法分离.③以TMBZ底物试剂盒用固相平板测定法检测SAP与脂蛋白相互结合.结果①生理条件的Ca2+浓度下,生物素-SAP以剂量依赖方式选择性地与HDL、VLDL结合.当SAP浓度分别达到1.5 nM和2 nM时,SAP与HDL、VLDL的结合达到半饱和,当SAP浓度达到4nM和16nM时,SAP与HDL、VLDL结合达到饱和.②SAP与HDL和VLDL的结合具有Ca+依赖性.③EDTA可影响SAP和HDL、VLDL结合.④无论有无Ca2+和EDTA存在,未发现SAP和LDL间的结合.结论SAP与HDL和VLDL结合而不与LDL结合.

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