OBSCN突变对于肝癌细胞增殖和迁移能力的影响
- 作者单位
- 山东第一医科大学(山东省医学科学院)药学院 山东第一医科大学(山东省医学科学院)临床与基础医学院
- 刊名
- 山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报
- 年份
- 2023
- 卷号
- 第7期
- ISSN
- 2097-0005
- 摘要
- 目的 构建细胞骨架蛋白OBSCN基因过表达和敲除的稳转细胞系,初步探究OBSCN突变对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 qPCR技术确定HepG2肝癌细胞有无OBSCN本底表达,慢病毒感染HepG2细胞构建过表达细胞系;Crispr cas9 技术构建敲除细胞系;并利用Western blot 技术检测敲除及过表达细胞Obscurin 蛋白表达量,CCK-8法和Transwell小室法探究OBSCN突变细胞株的增殖和迁移能力。结果 qPCR验证HepG2细胞无OBSCN本底表达,慢病毒感染得到HepG2 H21157过表达稳转细胞系和HepG2 GL119对照空载体稳转细胞系;菌落PCR、质粒PCR 以及基因测序结果验证敲除重组质粒reOBSCN 构建成功,转染得到OBSCN 敲除的HepG2 OBSCN KO 稳转细胞系和对照空载体HepG2 ecas稳转细胞系;Western blot技术验证OBSCN敲除及过表达细胞系构建成功;CCK-8法结果显示OBSCN过表达加快了HepG2细胞增殖,差异有统计学意义,OBSCN基因的敲除可以减慢HepG2细胞增殖,差异有统计学意义;...更多
- 文献类型
- 期刊
- 浏览量
- 26
-
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