Nrf2基因沉默的人支气管上皮细胞模型的建立
- 作者单位
- 郑州大学公共卫生学院 泰山医学院公共卫生学院
- 刊名
- 现代预防医学
- 年份
- 2017
- 卷号
- 第44卷
- 期号
- 第15期
- 页码
- 2802-2807,2822
- ISSN
- 1003-8507
- 分类号
- R734.2
- 摘要
- 目的 构建沉默Nrf2(Nuclear Factor-erythroid 2-related Factor 2,Nrf2)基因表达的RNA干扰质粒,建立稳定转染Nrf2干扰质粒的人支气管上皮细胞株BEAS-2B(Human Bronchial Cells),并对其在该细胞中的沉默效果进行鉴定。方法 根据Genbank上公布的人Nrf2核苷酸序列设计4条RNA抑制靶序列。化学合成后载入PGU6/RFP/Neo质粒载体构建成短发夹RNA(shRNA)表达载体,分别转染至BEAS-2B细胞,G418筛选稳定转染细胞株,RT-PCR(Real time-RCR)检测目标基因Nrf2的表达水平。结果 成功构建shRNA质粒表达载体,G418浓度为400mg/L时能够筛选到稳定转染的细胞株,构建的稳定细胞系均能特异性的抑制Nrf2基因的表达。结论 通过RNA干扰(RNA Interfering,RNAi)技术能够成功构建BEAS-2B细胞Nrf2下调表达的细胞模型,为研究Nrf2在肺癌抗氧化通路中的作用机制奠定了基础。
- 基金 国家自然科学基金
- 学科
- 【教育部学科】医学
- 文献类型
- 期刊
- 浏览量
- 1
-
被引次数
-
收录
核
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统计源
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