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作者

李梅 李宝全 宋文刚 郭慧君 王海荣 柴家前 常维山

作者单位

山东农业大学动物科技学院 泰山医学院免疫学教研室

刊名

中国免疫学杂志

年份

2008

卷号

第10期

页码

935-938

ISSN

1000-484X

关键词

新城疫病毒（Newcastle disease virus） ELISPOT IFN-γ检测

分类号

S855.3

摘要

目的:建立检测新城疫病毒(NDV)诱导特异性细胞免疫的ELISPOT试验方法,实时分析NDV免疫鼠的IFN-γ水平。方法:用NDV单克隆抗体包被96孔混纤板,在反应孔中加入小鼠脾淋巴细胞和NDV刺激抗原,37℃,5%CO2培养7小时。裂解细胞,依次加入酶标二抗、底物、显色液,倒置显微镜下计数ELISPOT斑点。结果:ELISPOT试验的特异性与培养时间和刺激抗原浓度密切相关。在106/孔的脾淋巴细胞浓度下,培养时间越长、刺激抗原越多,试验的特异性越低;当培养时间为7小时,抗原量为5μg/孔时,试验的特异性最强。ELISPOT斑点数,随细胞浓度的增加而增加,当小鼠的脾淋巴细胞浓度为106/孔时,最有利于斑点的计数,试验误差最小。结论:试验成功建立了检测NDV细胞免疫的ELISPOT方法,可用于NDV细胞免疫的研究。

基金

山东省自然科学基金

学科

【教育部学科】农学

文献类型

期刊

浏览量

28