获取途径

作者

李雅林 宋文刚 牛钟相 姜世金 常维山

作者单位

山东农业大学动物科技学院 泰山医学院免疫学教研室

刊名

中华微生物学和免疫学杂志

年份

2003

卷号

第9期

ISSN

0254-5101

关键词

铜绿假单胞菌 PA-SD株 外毒素A 基因Ⅲ区 克隆 同源性 比较

摘要

目的 测定脓胸病人铜绿假单胞菌分离株外毒素A的ADP核糖转移酶活性及其酶活区序列的变化，为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供试验基础和理论依据。方法 采用PCR技术，以铜绿假单胞菌PA-SD株的染色体DNA为模板，扩增ETAⅢ区基因。将产物克隆于pGEM^R-T Easy载体，鉴定后测序。用DNASTAR软件将测定的序列与GenBank中获得的其它CF分离株序列进行比较。同时平行测定PA-SD株与标准株PAl03的ADPRT活性。结果 扩增出目的基因片段，长度为658bp，获得了重组质粒。测序结果表明，PA-SD株与所比较菌株的氨基酸的同源性在94．4％～98．1％之间，其中与标准株的同源性为98．1％。第608位发生了相对于所比较的全部分离株的突变，第515位发生Ser到Gly的突变，同时ADPRT活性比标准株PAl03低。结论 本研究进一步阐明第515位氨基酸与ADPRT活性的关系，从而为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供理论依据。

文献类型

期刊

浏览量

25