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作者单位

山东农业大学动物科技学院 泰山医学院免疫学教研室

刊名

中华放射医学与防护杂志

年份

2003

卷号

第9期

页码

669

ISSN

0254-5098

关键词

铜绿假单胞菌 外毒素A 聚合酶链式反应 Ⅲ区基因

分类号

R378

摘要

目的测定脓胸病人铜绿假单胞菌分离株外毒素A的ADP核糖转移酶活性及其酶活区序列的变化,为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供试验基础和理论依据. 方法采用PCR技术,以铜绿假单胞菌PA-SD株的染色体DNA为模板,扩增ETAⅢ区基因.将产物克隆于pGEMR-T Easy载体,鉴定后测序.用DNASTAR软件将测定的序列与GenBank中获得的其它CF分离株序列进行比较.同时平行测定PA-SD株与标准株PA103的ADPRT活性. 结果扩增出目的基因片段,长度为658bp,获得了重组质粒.测序结果表明,PA-SD株与所比较菌株的氨基酸的同源性在94.4%～98.1%之间,其中与标准株的同源性为98.1%.第608位发生了相对于所比较的全部分离株的突变,第515位发生Ser到Gly的突变,同时ADPRT活性比标准株PA103低. 结论本研究进一步阐明第515位氨基酸与ADPRT活性的关系,从而为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供理论依据.

文献类型

期刊

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12