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作者

李雅林 宋文刚 牛钟相 姜世金 常维山

作者单位

山东农业大学动物科技学院 泰山医学院免疫学教研室

刊名

中华微生物学和免疫学杂志

年份

2003

卷号

第9期

页码

666-669

ISSN

0254-5101

关键词

铜绿假单胞菌 PA-SD株 外毒素A 基因Ⅲ区 克隆 同源性 比较

分类号

R346

摘要

目的　测定脓胸 (CF)病人铜绿假单胞菌分离株外毒素A(ETA)的ADP核糖转移酶(ADPRT)活性及其酶活区 (Ⅲ区 )序列的变化 ,为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供试验基础和理论依据。方法　采用PCR技术 ,以铜绿假单胞菌PA SD株的染色体DNA为模板 ,扩增ETAⅢ区基因。将产物克隆于pGEMR TEasy载体 ,鉴定后测序。用DNASTAR软件将测定的序列与GenBank中获得的其它CF分离株序列进行比较。同时平行测定PA SD株与标准株PA10 3的ADPRT活性。结果　扩增出目的基因片段 ,长度为 6 5 8bp ,获得了重组质粒 (PA SD ETA)。测序结果表明 ,PA SD株与所比较菌株的氨基酸的同源性在 94 .4 %～ 98.1%之间 ,其中与标准株的同源性为98.1%。第 6 0 8位发生了相对于所比较的全部分离株的突变 ,第 5 15位发生Ser到Gly的突变 ,同时ADPRT活性比标准株PA10 3低。结论　本研究进一步阐明第 5 15位氨基酸与ADPRT活性的关系 ,从而为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供理论依...更多

目的　测定脓胸 (CF)病人铜绿假单胞菌分离株外毒素A(ETA)的ADP核糖转移酶(ADPRT)活性及其酶活区 (Ⅲ区 )序列的变化 ,为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供试验基础和理论依据。方法　采用PCR技术 ,以铜绿假单胞菌PA SD株的染色体DNA为模板 ,扩增ETAⅢ区基因。将产物克隆于pGEMR TEasy载体 ,鉴定后测序。用DNASTAR软件将测定的序列与GenBank中获得的其它CF分离株序列进行比较。同时平行测定PA SD株与标准株PA10 3的ADPRT活性。结果　扩增出目的基因片段 ,长度为 6 5 8bp ,获得了重组质粒 (PA SD ETA)。测序结果表明 ,PA SD株与所比较菌株的氨基酸的同源性在 94 .4 %～ 98.1%之间 ,其中与标准株的同源性为98.1%。第 6 0 8位发生了相对于所比较的全部分离株的突变 ,第 5 15位发生Ser到Gly的突变 ,同时ADPRT活性比标准株PA10 3低。结论　本研究进一步阐明第 5 15位氨基酸与ADPRT活性的关系 ,从而为研究ETA在CF病人慢性肺部感染致病机理中的作用提供理论依据。收起

学科

【教育部学科】医学

文献类型

期刊

浏览量

35